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G. Molma B.

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J.O.GomálezB. y
J. G. Orna Y.
No. 13

Abril de 1967

�UNIVERSIDAD

DE

NUEVO

LEON

INSTITUTO DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS

LA HORMONA ANTIDIURETICA Y LA FUROSEMIDA
EN EL TRANSPORTE DE SODIO {( II)*

G. Malina B.
J.O~ ~González H.
J.G. Orozco V.

Cuaderno No.

*

Este artículo es la versi6n en español del origi
nal, en alemán, aceptado para su publicación por
la revista Arzneimittelforschung, ~ : ' r t l ~
ntor,
Munich, Alemania.

�LA HORMONA ANTIDIURETICA Y FUROSEMIDA EN EL
TRANSPORTE DE SODIO

(II)

G. Molina B.; J.O. González H. Y J.G. Orozco V.
Depto. de Farmacología, Facultad de Medicina,
Universidad de Nuevo Le6n.

El efecto de la hormona antidiurética en mem-branas vivas ha sido ampliamente estudiado por---Ussing, raefoed-Johnsen, Sawyer, etc. (1, 2, 3) y se acepta que el transporte de sodio es estimuladopor este octapéptido y simultanea, ~· quizá independientemente, produzca esta hormona un aumento de -permeabilidad al agua.
De los resultados obtenidos por nosotros anteriormente (4) se desprende que la Furosemida abate,
en la preparaci6n de Ussing (1) con vejiga urinaria
de sapo, la diferencia de potencial y la corrientede corto circuito, lo cual está en relaci6n directa
con el paso de sodio,

En dicho trabajo (4), se ha-

ce patente que la acci6n de la Furosemida (5) frente a la vejiga urinaria del sapo no es de efectos irreversibles, ya que el abatimiento de la diferenI

_;/
IJl.,LIO E

f,

Ci:.~,líú4

�eiá de potencial y de la corriente de corto circui-.

Cada uno de estos electrodos de Calomel se encuentra

to puede ser revertido por la administración de hor

sumergido en una solución saturada de KCl y conecta-

mona antidiurética.

do a cada espacio a través de un puente de Agar-Rin-

a

Esto último, ha hecho pensar -

los autores que exista una interacci6n de tipo --

ger "A" y "A'"•

La diferencia de potencial que exis

opuesto entre la hormona antidiurética y l? Furose-

te en estos espacios es creada por el paso de sodio-

mida.

de uno a otro lado de la membrana.

Este trabajo se ha desarrollado a efecto de-

Con el fin de p~

der aplicar una fuerza electromotriz externa, capaz-

examinar dicha posibilidad.

de anular la diferencia de potencial ya señalada, se
Material y Métodos.

colocan en cada cámara un puente de Agar-Ringer "B"y "B'", lo más separado posible de la vejiga urina.:.-

Para medir la tasa de transporte de sodio a
tr~vés de una membrana biológica se ha utilizado la

ria "S".

técnica de Ussing (1).

Para ello se emplea un -apa-

por donde se recibirá la fuerza electromotriz exter-

rato semejante al que originalmente emplearon los -

na, se encuentra sumergido, c ada uno de ellos, en un

autores, el cual permite la medición de la corrien-

recipiente que contiene una solución saturada de KCl

te de corto circuito (veáse Fig. 3). Se ha utiliza-

y AgCl , donde se encuentra a manera de electrodo,

do en este estudio la vejiga urinaria del sapo.

una espiral de plata.

En

El extremo de estos puentes

11

B 11 y

11

B111 ,

--

La fuerza electromotriz se ob

la Figura No.l se muestra esquemáticamente el mode-

tiene de una batería o pila seca "D " , y con la ayuda

lo de trabajo. La vejiga urinaria

de un reostato ''W" se ajusta de manera que la d ife--

sa entre las cámaras de lucita

11

S '' se coloca te_g

11

C11 , de tal forma --

rencia de potencial existente a uno y otro l ado de

o.

que determina la creación de 2 espacios. La diferen

la membrana "S", se mantenga en

cia de potencial entre ambos espacios se lee en un-

cierra a los espir.ales de plata y en el se puede in-

potenciometro "P", mediante 2 electrodos de Calomel.

tercalar un microamperímetro para cuantificar la co-

2

3

El circuito se

�e n ambos parámetros 15 mi nu t os de spués º
rriente necesaria para anular la diferencia de po-tencial producida por el paso de iones de sodio an-

Has t a este mome nto hemos de s crito l a t écn ic a c omo si se tratase de una s ola c ámar a pero en re ali

tes mencionado.

dad se trata de 2 cámaras, en las c ual es se ha proLa solución electrolítica que ocupa los espa-cios "C ", fue una soluci6n de Ringer para baj:racios
en un~ c~ntidad aproximada de 15 e.e.* El pH de la
soluci6n fué durante todos los experimentos de----

7.8 ~- 0.1.

La especie animal que se utiliz6 fue el

Bufo marinus .

cedido exactamente igual, y que tiene c ada una de
ellas la mitad de la vejiga urinaria del sapo, de
manera de tener una cámara que se puede considerarcomo testigo y otra como problema.

En este caso la

cámara problema recibi6, 15 minutos después de la administraci6n de hormona antidiurética, 10 mgr. de

La medición de la diferencia de potencial en--

Furosemida, también en el lado de la serosa.

Des--

tre uno y otr o lado de la membrana y la medici6n de

pués de ésto se anotaron los v alores eléctricos de-

la fue rza electromotriz nec esaria para anular esta-

cada cámara, cada 15 minutos hasta completar 1 20 --

difere ncia de potencial (corriente de corto circui-

minutos en total.

to) se anota respectivamente en voltios y amperios,

Resultados Experimentales.

llevándose a cabo cada 15 minutos durante cada unode lo~ experimentos.

Después de 3 lecturas con una

Los resultados obtenido~ en este estudio se

variación menor del 10% (período de estabilización),

observan en las Tablas 1 y 2 .

En la Tabla No. 1 se

se ~ñadi6 a la cámara del lado de la serosa 5 unid~

reportan los valores porcentuales en mi croamperios-

des de hormona antidiurética, tomándose las medidas

de la corriente de cor t o circuito , tanto para el -grupo t es t i go como para el tratado c on Furosemida. -

NaCl 111.0 mM; CaC1

2.7; KCl 3.35; NaHC0 ; ----3
2

Dextrosa 5. 5 rnM

5
4

�tir de e ste momento cuando las vejigas PfOblema reAl grupo testigo, una vez que los valores en microciben la Furosemida.

::,

Los valores recogidos de la -

amperios se han estabilizado, condición fijada en corriente de corto circuito en estas condic iones
estos experimentos para fijar el 100% de actividad,

..

recibe, como ya se ha mencionado, hormona antidiu--

muestran una tendencia muy notable a descenderº

Y-

la evaluación estadística conduce a considerar querética, y 15 minutos después los valores de corrie_g
las membranas problema pertenecen ya a otro univerte de corto circuito se encuentran considerablemenso.
te por encima del 100% inicial (416, 225, 278

%
En la Tabla No. 2, siguiendo el criterio ante-

e t c. ) •

La medición periódica, cada 15 minutos, derior, se reportan los valores porcentuales de la di

estos valores, muestra por lo general una tendencia
~erencia de potencial en milivoltios, tanto para el
a descender paulatinamente, pero durante 120 minu--

grupo testigo como para el tratado con Furosemida.tos, con excepción de un experimento, en todos ellos
Los valores obtenidos muestran básicamente en ambos
los valores se encuentran por encima del 100%.
grupos el mismo efecto registrado en la tabla anterior.

Al grupo problema, después de obtener el 100%-

ce actividad de acuerdo con el criterio anteriormenLas Figs. 2 y 3 muestran, respectivamente, los
te mencionado, recibe también la misma dosis de ho.E_
promedios de los valores de l a corriente de corto mona antidiurética que el grupo testigo, y a los 15
circuito y de la diferencia de potencial, tanto paminutos después de esta administración los valoresen microamperios son también considerablemente mayo

'

..

ra el grupo testigo como para el grupo tratado conFurosemida. "A" representa el punto de partida o va

res que el 100% inicial, y pertenecen, según el mélor 100%, "b" el punto donde se da hormona antidiutodo estadístico que posteriormente se detalla, ali

rética y las letras s iguientes los valores tomados-

mismo universo que las vejigas testigo.
6

Es a par-7

�peri6dica~ente caaa 15 minutos hasta 'completar 120-

nas testigo como las membranas problema han recibi-

minutos en total.

do la misma dosis de hormona antidiurétic a .

Estas gráficas corroboran lo ya-

de~crito en las Tablas 1 y 2.

te momento se agregó el diuréti co al grupo de mem-

Junto a las tablas -

~e da el valor de t según las tablas de probabilid~

En es-

..

branas problema y 15 minutos después de haberla ad-

de&lt;:: en cada una de las letras que corresponden a un

ministrado las membranas testigo y las membranas --

periodo determinado.

problema no pertenecen y°a a un mismo universo.

Es-

te efecto se prolongó al menos por 120 minuto~, que
Para calcular la probabilidad de la interven--

fue el período de observación.

ci6n del azar en nuestros experimentos se utiliz6 -

que por haber administrado la Furosemida a un grupo

la prueba de significaci6n de los promedios de acuer

solamente:,: es probable que las diferencias sean de-

do con la siguiente f6rmula;

bidas a la acción de esta substancia, e igualmente-

2

t =~¡donde

Sx

X

De ésto se infiere-

que la Fµrosemida ac túe como antagonista de la hor-

1
N

mona antidiurética en la vejiga de sapo.

s
Discusi6n.

De estos resultados y de los obtenidos en el trabajo anterior (4) se pueden mencionar los siguie~

De los resultados mencionados anteriormente,

tes hechos:

se desprende en forma completamente clara que una

Primero: Se confirma una vez más que la hormona an-

vez obtenida la estabilización de la actividad de
las membranas y agregado la hormona antidiurética,-

,

tidiurética produce un incremento en el --

15 minuto o:: después ambos grup·o s, problema y testigo,

transporte activo del sodio en la vejig a -

pertenecen a un mismo universo.

urinaria del sapo como ha sido ampliamente

Esto es fácil de_

aceptar y~ que hasta este momento tanto las membra-

demostrado con anterioridad por Ussing,
Kaefoed, Johnsen etc . (1, 2, 3).

8
9

�Segundo: Que la Furosemida en la vejiga de sapo dis

es una dosis menor que la utilizada en los

minuye el tran!"porte activo del sodio; de-

experimentos anteriores.

mostrado en el trabajo anterior por un aba

)

timiento de la diferencia de potencial en-

J

ambos lados de la membrana y por una dismi
nución de 1~ corriente de corto circuito,p~r,metro este último que según Ussing (1)
est? en relaci6n directa con el transpor-te de sodio.

Todos los resultados anotados arriba son signi-_
ficativos de acuerdo con los métodos estadísticos utilizados.

De estos se desprende que ambas substancias m~
difican el transporte activo del sodio y que ambasson capaces de actuar una en presencia de la otra;-

Tercero:Que l? di~minuci6n en el transporte de so-

ésto hace suponer que a pesar de haber utilizado do

dio producida por una dosis de 25 mgr. de-

sis muy elevadas de hormona antidiurética con el

Furo~emida e~ anulada y en algunas ocasio-

fin de saturar los posibles receptores biol6gicos -

nee llevada a límites más altos que aque--

(aunque la hormona antidurética utilizada que fue -

lloe considerados como controles por la --

Vasopresina-Lisina no es la natural de este tipo de

acci6n de 5 UI de hormona antidiurética, -

batracios (7, 8, 9) ), la Furosemida en las dosis -

según se desprende de la publicaci6n ante-

usadas continúa siendo capaz de disminuir el trans-

rior de los autores.

porte de sodio, por lo que estas substancias posi-blemente no actúen en un mismo receptor biológico -

Cuarto:

Que el incremento en transporte de sodio producido por una dosis de 5 UI de hormona
antidiurética es anµlado parcialmente porla ~cci6n de 10 mgr de Furosemida, la cual
10

ya que no se puede demostrar que la Furosemida desplace a la hormona antidiurética o viceversa.

Por-

estas razones, el mecanismo de acci6n de este diu-rético parece no ser de tipo competitivo al menos 11

�con le hormona antidiurética, sino simplemente que-

B i b 1 i o grafía.

eue pccionec; son pntag6nicas con relaci6n al despl~
1.- Ussing, H. H., "The Active Ion Tronsport through
ZPmiento del ion sodio en la membrana usada por nothe Isolated Frog Skin in the Light of Tracer c;otros.
Studies", Acta Physiol. Scand. 17: 1, 1949.
Rec;umen.
2.- Kaefoed-Johnsen

Con el fin de comprobar si la Furosemida actúa
I

v.

and H.H. Ussing, "The Contri

butions of Difusion and Flow to the passage of-

como Pntagonista de la hormona antidiurética, se --

o2 through Living Membranes", Acta Physiol.

hizo el pre~ente estudio en vejiga urinaria de sapo

scand. 28, 60, 1952.

utilizando una técnica de doble cámara, ambas con hormona antidiurética y solo una de ellas con Furosemida.

Los resultados hablan de una diferencia no

t~ble entre ambos grupos, por lo que se infiere un-

3.- Sawyer,

w.

H., "Effect of Posterior Pituitary -

Extract on Permeabili ty of Frog Skin to Water",
Amer. J. Physiol. 1965: 44, 1951.

poeible ant~goni~mo en estas condiciones experimen-

4.- Molina G., J. O. González H. and J. G. Orozco.,

tiles entre hormona antidiurética y Furosemida. - -

"Die Antidiuretische Hormon und Furosemide in -

Ap-rentemente este antagonismo no es de tipo compe-

der Natrium Transport", Arzneimittel Forschung,

titivo.

Dez., 1966.
5.- Bencomo L., J. Fyvolent, s. Kahana and L. Kahana,
"Clinical Experience with a New Diuretic, Furosemide", Curr. Therap. Res. 7 : 339, 1965.

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.BIBL:lOTEC'A CENTRAL

12
13

�6.- Document a Geigy , "Tabla s Científica s " , 5a . Edici6n , Pág . 34- 35 .

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7. - Kats ayannis PoGo and V. Du Vigneaud, "Nautre", -

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184 , 1465 ( 1959).

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Chem. 233, 1352 (1958).
9 .- Ac her, R., J. Chauvet, M. T. Lenci, F. Morel and

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J. Martz, J., Biochim. Biophys, Acta, 42, 379 -

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( 1960) .

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INSTITUTO DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS

Torre de la Rectorro Piso 7 Ciudad Universitaria
Apartado 897 - Tel. 3-87-45
Monterrey, N. L., Ml:x.

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                <text>Publicación del Instituto de Investigaciones Científicas de la Universidad de Nuevo León, publicado en la década de los sesenta. Presenta investigación y difusión científica realizada por la Universidad, así como noticias del ámbito científico internacional. Además de presentar noticias sobre las actividades académicas y científicas de las facultades y escuelas de la UNL.</text>
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              <text>Publicación del Instituto de Investigaciones Científicas de la Universidad de Nuevo León, publicado en la década de los sesenta. Presenta investigación y difusión científica realizada por la Universidad, así como noticias del ámbito científico internacional. Además de presentar noticias sobre las actividades académicas y científicas de las facultades y escuelas de la UNL.</text>
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              <text>El diseño y los contenidos de La hemeroteca Digital UANL están protegidos por la Ley de derechos de autor, Cap. III. De dominio público. Art. 152. Las obras del dominio público pueden ser libremente utilizadas por cualquier persona, con la sola restricción de respetar los derechos morales de los respectivos autores</text>
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