https://hemerotecadigital.uanl.mx/files/original/471/21438/Respyn_Revista_de_Salud_Publica_y_Nutricion_2005_Vol_6_No_3_Julio-Septiembre.pdf c42fee3af15e13bbd31bd3fc84727ef8 PDF Text Text �CALIDAD SANITARIA DE ALIMENTOS DISPONIBLES AL PÚBLICO DE CIUDAD OBREGÓN, SONORA, MÉXICO. Anacleto Félix-Fuentes, Olga Nydia Campas-Baypoli y Mercedes Meza-Montenegro Departamento de Biotecnología y Ciencias Alimentarias, Instituto Tecnológico de Sonora (Sonora, México) Email: afelix@itson.mx. Introducción En general las enfermedades transmitidas por alimentos, la mayoría de la cuales son de origen microbiano, constituyen uno de los principales problemas de salud pública a nivel mundial, donde los alimentos y el agua contaminada son fuentes importantes de contagio (1, 2, 3). En Estados Unidos de América se estima que cada año ocurren 76 millones de enfermedades de origen alimentario, lo que conlleva a 350,000 hospitalizaciones y alrededor de 5000 muertes (4). En México durante el periodo de 1980 a 1989 el Laboratorio Nacional de Salud Pública confirmo 58 brotes de toxiinfecciones alimentarias de origen microbiano y parasitario a nivel nacional (5), en el año 2002 el Sistema Nacional de Información en Salud reportó a nivel nacional 3612 casos de intoxicaciones alimentarias de origen bacteriano, de los cuales 76 se presentaron en el estado de Sonora (6). Evidentemente, las estadísticas que abarcan las enfermedades transmitidas por alimentos no son fiables, los datos publicados sólo representan una parte del número verdadero de casos (7), sin embargo, aunque los sistemas nacionales de información en salud han mejorado substancialmente, aun no se puede precisar cuantas personas contraen toxiinfecciones alimentarias en una región específica, información indispensable para alcanzar mejor eficacia en los sistemas de prevención y control de estas enfermedades (8). El control sanitario en la preparación de alimentos es determinante para reducir los factores de riesgo que influyen en la transmisión de enfermedades por alimentos para proteger la salud del consumidor (9). Los criterios microbiológicos ofrecen a la industria alimentaria y a los organismos reguladores las directrices para controlar los sistemas de elaboración de alimentos (10). Como criterios microbiológicos se pueden utilizar microorganismos indicadores de contaminación, la presencia de microorganismos patógenos específicos, la detección de una toxina específica producida por un patógeno. Los microorganismos indicadores que generalmente se cuantifican para determinar calidad sanitaria de alimentos son mesofílicos aerobios, mohos, levaduras, coliformes totales, coliformes fecales, entre otros (11). Algunos de los microorganismos patógenos implicados en infecciones o intoxicaciones alimentarias son: Salmonella spp. bacilo corto gram negativo que pertenece al a familia de las Enterobacterias. Entre las especies de mayor importancia se encuentran Salmonella typhi y Salmonella paratyphi que son causantes de septicemia, además existen mas de 2300 serotipos que producen una infección intestinal conocida como salmonelosis. Los alimentos de mayor riesgo de contaminación por Salmonella son las carnes crudas, aves de corral, pescado, camarón, huevo, leche, productos lácteos, ensaladas, pasteles con relleno, mantequilla de cacahuate, cocoa, chocolate y el agua. Se estima que en Estados Unidos se producen de 2 a 4 millones de casos de Salmonelosis al año, la mayoría como resultado a la exposición a alimentos crudos (carne cruda), pollo, leche y huevos (12). En México D.F. durante 1998 se presentó un brote de infección gastrointestinal por S. enteritidis en 155 trabajadores de un hospital, el cual probablemente se debió a la ingesta de tortas de carne (13). �A nivel nacional los serotipos más aislados son S. typhimurium, S. enteritidis, S. derby, S. agona y S. anatum (14), y los casos nuevos de paratifoidea y otras salmonelosis en el año 2002 fueron 4,540 a nivel nacional, de los cuales 288 se presentaron en el estado de Sonora, lo cual representó el 6% del total de casos (15). Otro microorganismo de gran importancia en Salud pública es el Staphylococcus aureus, pertenece a la familia Micrococaceae, y son cocos gram positivos. Algunas cepas son capaces de producir una toxina termoestable la cual causa enfermedad en el hombre. La contaminación de alimentos por S. aureus, está asociada con una gastroenteritis, que se manifiesta con náuseas, vómito, calambres abdominales y diarrea (16). Entre los alimentos implicados en la enfermedad se encuentran carne y derivados, aves, huevo, ensaladas, leche y productos lácteos, productos horneados con relleno, y en especial aquellos alimentos que requieren mucha manipulación durante su preparación y que necesitan mantenerse por largos periodos de tiempo a altas temperaturas después de su cocinado (17). En una empresa de Chihuahua, México en 1996 se presentó un brote por S.aureus (165 casos) por el consumo de ensalada de pollo contaminada (18). Otros de los patógenos que han adquirido gran importancia en los últimos años como causantes de toxiinfecciones alimentarias son los de la familiaVibrionaceae, como el Vibrio parahaemolitycus bacteria gram negativa, halófila, se encuentra naturalmente en ambientes marinos, causa una infección gastrointestinal. Los síntomas que produce la enfermedad son diarrea acuosa, cólicos abdominales, que puede acompañarse por nauseas, vomito, dolor de cabeza, fiebre y escalofríos, generalmente el padecimiento va de leve a moderado, aunque algunos casos requieren hospitalización (19). Las infecciones producidas por este microorganismo se han asociado al consumo de pescados y mariscos crudos, semi-cocidos o recontaminados después de la cocción. Además existe una correlación positiva entre la probabilidad de infección y los meses más cálidos del año, reportándose la presencia de altas densidades de V. parahaemolyticus en aguas marinas y en ostras (20, 21, 22). A nivel nacional se reporta la prevalencia de V. parahaemolyticus en los alimentos de origen marino procedentes de las costas de Yucatán, Quintana Roo y Tamaulipas, y se han presentado casos de diagnósticos positivos en pescados y mariscos que han provocado cuadros graves de gastroenteritis (23, 24). Otro microorganismo patógeno del la Familia Vibrionaceae que ha sido poco investigado en México es el Vibrio vulnificus, agente causal de infecciones o lesiones en la piel, gastroenteritis y una septicemia primaria, en personas sanas causa gastroenteritis leves, sin embargo puede causar una septicemia grave en personas inmunodeprimidas, provocando la muerte en el 50% de los casos, los alimentos implicados son pescado, moluscos y mariscos consumidos crudos (25). En Durango, México durante el período de 1990 a 1999, se reportan 8 casos de septicemia por V. vulnificus, todos pacientes con antecedentes de enfermedad hepática crónica y en 5 de los casos se asoció la enfermedad con el consumo de mariscos crudos, el tiempo de fallecimiento fue de 4 días (26). Por otro lado, es importante aclarar que no se encontraron reportes sobre la calidad sanitaria de alimentos de consumo frecuente en el Estado de Sonora, considerándose de suma importancia estudiar la presencia de los microorganismos indicadores de contaminación, así como de patógenos específicos en los diversos grupos de alimentos disponibles para la población de Cd. Obregón, Sonora, para conocer los riesgos microbiológicos a los que se encuentran expuestos. Material y Métodos Muestreo La presente investigación se realizó en ciudad Obregón, Sonora, México, donde se seleccionaron aleatoriamente los sitios de muestreo. Los resultados que se presentan son de muestreos independientes realizados durante el periodo de febrero de 1998 a octubre de 2002. Se recolectaron muestras de jugo de naranja natural, ensalada de frutas, carnes preparadas, agua de frutas naturales, carne para hamburguesas, pescado fresco y ostras para análisis microbiológicos. Las determinaciones realizadas variaron de acuerdo a la naturaleza del alimento y a las �especificaciones establecidas por la secretaría de salud. En la Tabla 1 se muestran los grupos de alimentos estudiados y algunas condiciones específicas de su recolección. Durante el verano (muestreos de junio y julio) en Cd. Obregón, Sonora las temperaturas promedio mensuales fueron de 30°C, con máximas de 40°C±3, mientras que en invierno (muestreos de octubre, noviembre y diciembre) las temperaturas promedios fueron de 27, 22 y 19°C respectivamente (27). Tabla 1. Clasificación de los alimentos estudiados y condiciones de muestreo. CLASIFICACIÓN Alimentos de consumo fresco ALIMENTO Jugo de naranja 1 PERIODO DE MUESTREO MUESTREO No. SITIOS Y REPETICIONES Junio–Julio1998 Semanal 6 sitios, 6 repeticiones Ensalada de frutas 1 Agua de frutas naturales 2 Ensalada verduras crudas 2 Semanal Junio–Julio1998 Quincenal Julio–Oct-2000 Quincenal Octubre-Dic1999 Quincenal Queso fresco 2 Agosto-Oct2002 Alimentos cocinados Alimentos preparados a Agosto-Dic-1999 base de carne, y Enero-Mayoverduras y especias 2 2000 Carne preparada 2 Carne preparada para hamburguesas 2 Alimentos crudos Filete de lisa (Mugil cephalus) 1 Octubre-Dic1999 5 sitios, 8 repeticiones 6 sitios, 5 repeticiones 7 sitios, 5 repeticiones Mensual 6 sitios, 7 repeticiones Quincenal Quincenal 6 sitios, 5 repeticiones 5 sitios, 8 repeticiones Junio–Nov-2001 Junio–Julio1998 5 sitios, 6 repeticiones Semanal 5 sitios, 5 repeticiones Quincenal Pata de mula (Anadara sp) 1 Sep-Enero-2001 6 sitios, 4 repeticiones 1 : Alimentos recolectados en puestos ambulantes, 2: Alimentos recolectados en establecimientos fijos. Análisis microbiológicos Para realizar los análisis microbiológicos se utilizaron las metodologías establecidas en las Normas Oficiales Mexicanas, publicadas en el Diario Oficial de la Federación (NOM-110-SSA1-1994, NOM092-SSA1-1994, NOM-111-SSA1-1994, NOM-112-SSA1-1994, NOM-115-SSA1-1994, NOM-114SSA1-1994, NOM-031-SSA1-1993). Preparación de la muestra. La homogenización de las muestras líquidas se realizó por agitación, las muestras sólidas se licuaron con el diluyente no más de 2 minutos. Posteriormente se procedió a la realización de las diluciones decimales (28). �Mesofílicos aerobios. Se utilizó la técnica por vaciado en placa, el método consistió en contar las colonias que se desarrollaron en el agar estándar métodos después de 48 h de incubación a 35 ±2 °C, suponiendo que cada colonia proviene de un microorganismo de la muestra bajo estudio, los resultados se reportaron como UFC/ml o g de muestra (29). Mohos y Levaduras. Se utilizó la técnica por vaciado en placa, el método consistió en contar las colonias que se desarrollaron en el agar dextrosa de papa acidificado después de 24, 48 y 72 h de incubación a 30 ±2 °C, suponiendo que cada colonia proviene de un microorganismo de la muestra bajo estudio, los resultados se reportaron como UFC/ml o g de muestra (30). Coliformes Totales y Fecales. Se utilizó la técnica de tubos de fermentación múltiple (dilución en tubo) del número más probable (NMP), el cual proporciona una estimación estadística de la densidad microbiana presente con base a que la probabilidad de obtener tubos con crecimiento positivo disminuye conforme es menor el volumen de muestra inoculado. El método se basa en que las bacterias coliformes, fermentan la lactosa incubadas a 35 ±1 °C (coliformes totales) ó 44.5 °C (coliformes fecales) durante 24 a 48 h, resultando en la producción de ácidos y gas, el cuál se manifiesta en las campanas de fermentación (31). Determinación de patógenos. Se realizó una cuenta total de Staphylococcus aureus mediante la siembra directa en placas de Baird-Parker, con la confirmación de las colonias típicas con la prueba de la coagulasa y la termonucleasa (32). Además se aislaron en medios selectivos e identificaron por pruebas bioquímicas Salmonella spp.(33), Vibrio parahaemolyticus y Vibrio vulnificus (34). Las especificaciones sanitarias utilizadas para valorar los resultados por tipo de alimento fueron las publicadas en la NOM-093-SSA1-1994 (35) y la NOM-121-SSA1-1994(36) (Ver Tabla 2) Tabla 2. Especificaciones microbiológicas establecidas para diversos alimentos. NOMBRE DEL PRODUCTO Ensaladas verdes, crudas o de frutas * Salsas y purés cocidos * Alimentos cocinados a base de carne de mamíferos, aves, pescados * Aguas preparadas * Queso fresco ** DETERMINACIONES LIMITE MÁXIMO PERMISIBLE Mesofilos aerobios UFC/g 150,000 Coliformes totales NMP/g 100 Mesofilos aerobios UFC/g 5,000 Coliformes totales NMP/g 50 Mesofilos aerobios UFC/g 150,000 Coliformes totales NMP/g menos de 10 Mesofilos aerobios UFC/g 150,000 Coliformes totales NMP/g 100 Coliformes fecales NMP/g Negativo Coliformes fecales NMP/g 100 Mohos y levaduras (UFC/g) 500 Ausente �Salmonella en 25 g 1000 Staphylococcus aureus (UFC/g) Negativo Listeria monocytogenes en 25 g Zumos, néctares, bebidas a base de frutas y Mesofilos aerobios UFC/g verduras no pasteurizadas *** Coliformes totales NMP/g 100,000 100 *NOM-093-SSA1-1994 ; ** NOM-121-SSA1-1994; *** Límites microbiológicos de la ICMSF (International Commission on Microbiological Specifications for Foods). Resultados En la Tabla 3 se presentan los resultados de microorganismos mesofílicos aerobios para los diversos alimentos, en el caso del jugo de naranja natural el 78 % de las muestras analizadas cumplió con la especificación microbiológica para zumos o néctares de frutas no pasteurizados de 100,000 UFC/g establecidos por la Comisión internacional de especificaciones microbiológicas para alimentos (siglas en inglés ICMSF), ya que la secretaría de salud en México no lo específica. Se presentaron densidades de microorganismos mesofílicos aerobios en el jugo de naranja desde 60 a 547,000 UFC/ml, sobrepasando el valor máximo por 5.47 veces la norma. En las ensaladas de frutas (conocidas en la región como pico de gallo) sólo el 53% de las muestras cumplieron con el estándar de 150,000 UFC/g de microorganismos mesofílicos aerobios de acuerdo a la Norma Oficial Mexicana, con cuentas de 200 a 450,000 UFC/g de alimento, sobrepasando el valor máximo hasta 3 veces la especificación. Las aguas de frutas naturales (fresa y piña) el 68% de las muestras analizadas presentaron densidades de mesofílicos aerobios dentro de norma, presentándose cuentas desde 11,600 a 850,000 UFC/ml de muestra, excediendo el valor máximo 5.7 veces la norma. El 87% de los alimentos preparados presentaron cuentas de mesofílicos aerobios por debajo de las 150,000 UFC/g, que es el límite máximo establecido, presentándose rangos desde 0 a 230,000 UFC/g de muestra, excediendo el valor máximo 1.5 veces la especificación. En el caso de la carne preparada para hamburguesas el 95% de las muestras presentaron cuentas por debajo de 150,000 UFC/g, con cuentas desde 250 a 450, 000 UFC/g de alimento, sobrepasando el valor máximo 3 veces la especificación. Tabla 3. Resultados de mesofílicos aerobios en los diversos alimentos, expendidos en Cd. Obregón, Sonora. ALIMENTO PROMEDIO RANGO MUESTRAS DENTRO DE NORMA (UFC/g ó ml) (UFC/g ó ml) Jugo de naranja natural (n =36) 72,612 60 - 547,000 28 (78)* Ensalada de frutas (n =30) 197,713 200 – 450,000 16 (53)* Agua de frutas naturales (n =40) 152,840 11,600 – 850,000 27 (68)* Alimentos preparados (n =48) 31,753 <1 – 230,000 42 (87)* Carne preparada para hamburguesa (n =40) 27,476 250 – 450,000 38 (95)* �* Los números entre paréntesis expresan porcentaje. En la Tabla 4 se presentan los resultados para coliformes totales y coliformes fecales en los alimentos analizados, en el caso del jugo de naranja natural para coliformes totales el 56 % de las muestras analizadas cumplieron con las especificación de 100 NMP/ml de alimento, donde de los 6 sitios verificados sólo 2 presentaron valores aceptables. En el caso de coliformes fecales el 66 % de las muestras presentaron valores positivos, presentándose cuentas muy bajas en dos de los sitios con rangos de 2 a 4 NMP/ml, lo anterior refleja que las condiciones higiénicas durante la preparación del producto es determinante para una adecuada calidad sanitaria. En las muestras de ensalada de frutas los resultados son drásticos, ya que sólo el 4 % de las muestras analizadas cumplieron con la normatividad para coliformes totales, y el 100% fueron positivos para coliformes fecales con rangos de 3 a 1100 NMP/g y en una de las muestras se detectó Salmonella spp., considerándose este alimento de alto riego para la salud de los consumidores. El 18 % de las muestras de agua de frutas naturales cumplieron con la especificación microbiológica para coliformes totales, con rangos de 15 a 1100 NMP/g de alimento, disminuyendo a un 13 % de muestras positivas para coliformes fecales, presentándose sólo 3 muestras negativas. Para queso fresco el 9 % de las muestras presentaron valores dentro de norma para coliformes fecales, con rangos de 500 a 1100 NMP/g de alimento. Los resultados anteriores demuestran que la manipulación de alimentos de consumo en fresco, sin tratamientos posteriores de calentamiento, son altamente susceptibles a contaminación microbiana. En el caso de los alimentos cocinados las densidades de coliformes disminuyeron considerablemente. De los alimentos preparados (cocinados con mezcla de carne, verduras y especias) el 62% de las muestras cumplieron con la norma, presentándose densidades de coliformes con rangos de <1 a 17 NMP/g de alimento, sobrepasando el valor máximo la especificación 1.7 veces y para coliformes fecales el 67% de las muestras fueron negativas. Para la carne preparada para hamburguesas el 92% de las muestras presentaron densidades menores de 10 NMP/g para coliformes totales, las muestras que sobrepasaron la especificación fue con rangos de 3 a 200 NMP/g de alimento, el 95 % de las muestras fueron negativas para coliformes fecales, sólo se presentaron dos muestras positivas con 4 NMP/g de alimento. Tabla 4.Valores promedios de coliformes totales (NMP/ml o g) en los diversos alimentos. Alimento Coliformes totales PROMEDIO RANGO (NMP/g ó ml) (NMP/g ó ml) Jugo de naranja natural (n =36) 445 <1 – 1,100 Ensalada de frutas (n =30) 1033 Agua de frutas naturales (n =40) Queso fresco (n =35) Alimentos preparados (n =42) MUESTRAS DENTRO DE NORMA Coliformes fecales PROMEDIO RANGO MUESTRAS DENTRO DE NORMA (NMP/g ó ml) (NMP/g ó ml) 20 (56)* 354 <1 – 1,100 12 (34)* 40 – 1,100 1(4)* 816 3– 1,100 0 (0)* 607 15 – 1,100 7 (18)* 245 <1 – 1,100 5 (13)* 1083 500 – 1,100 SEM 989 1 – 1100 3 (9)* 6 <1 – 17 26 (62)* 2 <1 – 17 28 (67)* �Carne preparada para hamburguesa (n =40) 7 <1 – 200 37 (92)* 0.2 <1 – 4 38 (95)* * Los números entre paréntesis expresan porcentaje. SEM: sin especificación microbiológica Los microorganismos patógenos investigados en los alimentos se presentan en la Tabla 5, se analizaron un total de 221 muestras para Salmonella spp. de los cuales sólo en una de ellas (ensalada de frutas) se logró aislar e identificar este microorganismo por pruebas bioquímicas. En las muestras procedentes de establecimientos fijos de venta a granel (comidas corridas) de carnes preparadas y ensaladas de verduras se determinó la carga microbiana de Staphylococcus aureus, sobrepasando la norma el 10% de las muestras de carnes preparadas, equivalentes a 3 muestras con cuentas de 1160, 4700 y 8000 UFC/g de alimento de S.aureus, el resto de estas (90%) presentaron cuentas muy bajas, en un rango de 0-170 UFC/g. En el caso de las ensaladas de atún, papa o carnes frías, 8 de las muestras sobrepasaron las 1000 UFC/g de alimento, con un rango de 1130 a 10,000 UFC/g de alimento de S.aureus. La bacteria de V. parahaemolyticus se aisló en el 40 % de las muestras de pescado fresco (Mugil cephalus), y en el 25 % de las muestras de Pata de mula (Anadara sp), además en Pata de mula se aisló V. vulnificus en el 25 % de las mismas. Tabla 5. Microorganismos patógenos investigados en diversos alimentos. Producto alimenticio Microorganismo Investigado: Salmonella spp. Muestras Analizadas (n = 221) Muestras Positivas Jugo de naranja natural 36 0 (0)* Ensalada de frutas 30 1 (3) Agua de frutas naturales 40 0 (0) Alimentos preparados 40 0 (0) Carne preparada para hamburguesas 40 0 (0) Queso fresco 35 0 (0) Microorganismo Investigado: Staphylococcus aureus Muestras analizadas (n = 60) Muestras fuera de norma Carnes preparadas 30 3 (10) Ensaladas frescas 30 8 (27) Microorganismo Investigado: Vibrio parahaemolyticus Muestras Analizadas (n = 54) Muestras Positivas Pescado fresco (Mugil cephalus) 30 12 (40) Pata de mula (Anadara sp) 24 6 (25) Microorganismo Investigado: Vibrio vulnificus Muestras analizadas (n = 24) Muestras Positivas 24 6 (25) Pata de mula (Anadara sp) * Los números entre paréntesis expresan porcentaje. Discusión �De los alimentos de consumo fresco (jugo de naranja, ensalada de frutas, agua de frutas naturales) se presentan los resultados de 106 muestras para mesofílicos aerobios y coliformes totales, aumentando a 141 muestras para coliformes fecales, porque se incluyó el queso fresco. En general los alimentos de consumo fresco presentaron densidades altas de los microorganismos indicadores, con 32 % de mesofílicos aerobios, 73 % de coliformes totales y 85 % de coliformes fecales que sobrepasaron las especificaciones microbiológicas, comparados con porcentajes del 9, 21 y 18 % para los mismos microorganismos respectivamente en los alimentos cocinados, donde se analizaron un total de 88 muestras. Los resultados anteriores se atribuyen a la gran manipulación a la que se someten los alimentos de consumo fresco durante su preparación, aunado a prácticas higiénicas inadecuadas que se observaron en algunos sitios de venta ambulantes en el caso de jugo de naranja y ensalada de frutas. Las aguas de frutas naturales se recolectaron en establecimientos fijos, donde se contaba con suministro suficiente de agua y refrigeración, sin embargo los resultados fueron semejantes a los alimentos anteriores. En el caso de queso fresco por arriba del 85 % de las muestras sobrepasaron las especificaciones microbiológicas, lo cual se atribuye a deficiencias en la manipulación y conservación del producto durante su procesamiento y venta. Por otra parte los alimentos cocinados, donde se incluyeron los alimentos preparados y la carne preparada para hamburguesa, cumplieron en mayor medida con los parámetros microbiológicos, lo cual se atribuye a que los productos fueron elaborados en establecimientos cerrados, con suministro suficiente de agua y equipo de limpieza, además el tratamiento térmico al final del proceso de elaboración fue determinante para disminuir en gran medida la carga microbiana. Los establecimientos fijos mostraron en general condiciones de higiene adecuadas, lo cual es un aspecto positivo, ya que se ha demostrado en algunos estudios la clara significancia estadística en las características higiénicas de los establecimientos y la aparición de bacterias coliformes fecales (37, 38). Resultados similares a los obtenidos en el presente estudio se reportan en Cuba, en programas de vigilancia microbiológica de alimentos que se venden en las calles, donde se presentaron altos porcentajes de muestras (34.8 %) que sobrepasan las especificaciones microbiológicas para coliformes totales, en alimentos preparados, jugos, bebidas, productos cárnicos y de repostería (39). Además estos indicadores fuera de norma se reportan en el 96.5 % de muestras de alimentos analizados en la Costa de la Atlántica Colombiana (40). Los problemas sanitarios detectados en alimentos a nivel mundial, reflejan un alto riesgo de contraer toxiinfecciones alimentarias. Las soluciones de estos problemas, requieren incrementar la educación sanitaria de los manipuladores y consumidores, así como elevar la capacitación técnica de los inspectores (41). En cuanto a la presencia de patógenos en los alimentos investigados, Salmonella spp. se aisló en el 0.45 % del total de muestras analizadas, pero se ha reportado la dificultad de la detección y aislamiento de Salmonella spp. en alimentos, debido a que se encuentra en un bajo número y en presencia de una gran cantidad de organismos competitivos (42). Sin embargo con las altas cargas microbianas de los indicadores de contaminación en estos alimentos, pueden considerarse de alto riesgo para la salud del consumidor. En el caso de las carnes preparadas y ensaladas de pollo o carnes frías, las cuentas microbianas de S. aureus fueron bajas, aunque se presentaron muestras fuera de norma en ambos alimentos, lo anterior se puede atribuir al inadecuado manejo del producto después de elaborado y a su exposición por largos periodos a temperatura ambiente. Sin embargo el riesgo de contraer una intoxicación por S. aureus se considera mínima, debido a que en el presente estudio sólo una muestra de ensalada presentó una cuenta total de S. aureus máxima de 10,000 UFC/g y se necesitan cuentas mayores de 105 UFC/g del microorganismo para que se produzca la enterotoxina en el alimento (43). Por otro lado, la mayoría de los casos de intoxicación alimentaria por S. aureus se deben a contaminación a partir de portadores humanos infectados (44). Por lo anterior es determinante para el control de este patógeno la vigilancia constante de los manipuladores de alimentos como �posibles portadores, llevar a cabo buenas prácticas de higiene y conservación de los alimentos. En el caso de la presencia de Vibrio parahaemolyticus en un porcentaje alto en las muestras de filete de lisa (40%), se puede explicar por las temperaturas calidas registradas durante los meses de junio y julio, período durante el cual se realizó el muestreo. Varios estudios reportan mayores densidades de estos microorganismos en alimentos marinos durante los meses calidos (45, 46). La presencia de Vibrio vulnificus disminuyó considerablemente (25%), porque las muestras se recolectaron durante el invierno. Por otro lado en estudios realizados en Chetumal, Quintana Roo se encontraron prevalencias de V. vulnificus del 29.49 %, semejantes a las del presente estudio (47). Los alimentos marinos estudiados se consideran de alto riesgo si se consumen crudos o semi-cocidos, los cuales pueden representar un factor muy importante en los padecimientos gastrointestinales de origen desconocido en la región. Conclusiones Los resultados del presente estudio dan una idea del alto riesgo para los consumidores de contraer alguna enfermedad transmitida por los alimentos, y de su deficiente control sanitario. Los alimentos de consumo fresco fueron los que presentaron mayores deficiencias en su calidad sanitaria, considerándose de mayor riesgo, comparándolos con los alimentos preparados (cocinados). Sin embargo, en ambos grupos se presentaron deficiencias en las prácticas de higiene y manipulación durante su elaboración. Además la presencia de patógenos como Salmonella spp, S. aureus, V. parahaemolyticus y V. vulnificus en ciertos grupos de alimentos, debe considerarse una alerta importante, debido a los problemas de salud que provocan. En general, se deben de tomar las medidas necesarias para mejorar el control sanitario de los alimentos disponibles al público, para disminuir los riesgos de enfermedades transmitidas por alimentos. Para lo anterior será necesaria la participación de autoridades sanitarias, preparadores de alimentos y consumidores, además de mejorar la educación sanitaria en el manejo de alimentos, así como la implementación de programas y procedimientos de aseguramiento de la calidad. Agradecimientos Un agradecimiento al Instituto Tecnológico de Sonora, que otorgó los medios económicos para la realización del presente estudio, y especialmente a los estudiantes de químico, Ingeniero Biotecnólogo que participaron en la realización de sus trabajos de tesis. Resumen El objetivo de este estudio fue determinar la calidad sanitaria de alimentos altamente consumidos por la población de ciudad Obregón, Sonora, México. Se realizó un estudio descriptivo considerando los resultados de muestreos de Febrero 1998 a Octubre de 2002. Los parámetros microbiológicos investigados fueron mesofílicos aerobios, coliformes totales, coliformes fecales, Salmonella spp. , Staphylococcus aureus, Vibrio parahaemolyticus y Vibrio vulnificus. Las determinaciones microbiológicas se llevaron a cabo utilizando los métodos oficiales establecidos por la Secretaría de Salud. Se encontró que productos alimenticios de consumo fresco, para microorganismos mesofílicos aerobios el 32 % de las muestras analizadas (n =106) sobrepasaron la especificación microbiológica respectiva, y por arriba del 70% de las muestras analizadas sobrepasaron las especificaciones sanitarias para coliformes totales y fecales . En el caso de alimentos preparados sometidos al proceso de cocción (n =88), el 9 % de las muestras analizadas para mesofílicos aerobios sobrepasaron las especificaciones microbiológicas, el 21 % para coliformes totales y el 18 % para coliformes fecales. La presencia de Salmonella. , Staphylococcus y Vibrio , fue detectada en las muestras con rangos del 3 al 40%. Los resultados anteriores demuestran que es necesario mejorar el control sanitario de los productos alimenticios analizados para la protección de los consumidores, mediante la implementación de programas de verificación sanitaria y de capacitación del personal en el manejo higiénico de los alimentos, además de la aplicación de sistemas de buenas prácticas de manufactura durante el procesamiento de los alimentos. �Palabras clave: calidad sanitaria, indicadores microbiológicos, control sanitario, patógenos Abstract The objective of this study was determinate the sanitary quality of food highly consumed by the population of city Obregon, Sonora, Mexico. The study was conducted from February 1998 to October 2002. Microbiological parameters measured were aerobic mesophilic microorganisms, total coliforms, fecal coliforms, Salmonella spp. , Staphylococcus aureus, Vibrio parahaemolyticus and Vibrio vulnificus, which performed according to standards methods of Ministry of Health from Mexico, published in the Federation Official Newspaper. The results demonstrated that 32 % of the analyzed samples of fresh foods such as the juice of orange, fresh cheese, salad of fruits and the fresh water of natural fruits were above of the Mexican Norm for aerobic mesophilic microorganisms. In fact, 70 % of these samples had values above those of Mexican guideline for total and fecal coliformes. On the other hand, in cooked only 9 % of the analyzed samples had values greater than established by the Mexican Norm for aerobic mesophilic microorganisms with 21 % and 18 % for total coliforms and fecal coliforms respectively. In addition, the presence of Salmonella, Staphylococcus and Vibrio, was detected in the samples in the range of 3 to 40 %. The results indicate that sanitary control of fresh foods in needed for consumer´s protection. This problem could be mitigated through an adequate program of health education and the establishment of good practices of manufacture during foods processing. Key words: sanitary quality, microbiological indicators, sanitary control, pathogens Referencias 1. Adams, M.R. y M.O. Moss 1997. Microbiología de los alimentos. Editorial Acribia, S.A. 171, 178, 182 2. ICMSF International Commission on Microbiological Specifications for Foods. 1998. Microorganismos de los alimentos. Características de los patógenos microbianos. Acribia. Zaragoza 606 p 3. González, A.S., N.J. Camargo, P.L. Castellanos, G. Gonzalvez, M. Perdomo, M.R. Grillo, A. Romero. S/A. Guía para el establecimiento de sistemas de vigilancia epidemiológica de enfermedades transmitidas por alimentos (VETA) y la investigación de brotes de toxiinfecciones alimentarias. CEPIS-OPS-OMS.http://www.cepis.opsoms.org/bvstox/e/fulltext/guiaveta/guiaveta.pdf 4. Mead, P.S., L. Slutsker, V. Diert, L.F. McCaig, J.S. Bresee, C. Shapiro, et al 1999. Food-related illness and death in the Unites States. Emerging Infectious Diseases, 5:607-25. 5. Parrilla-Cerrillo, M.C., J.L. Vazquez-Castellanos, E.O. Saldate-Castañeda y L.M. NavaFernández 1993. Brotes de toxiinfecciones alimentarias de origen microbiano y parasitario. Salud Pública de México. Vol 35 No.5:456-463. 6. Anuario Estadístico de la Secretaría de Salud. 2002. Sistema Nacional de Información en Saludhttp://sinais.salud.gob.mx/publicaciones/publicaciones.htm# 7. Adams, M.R. y M.O. Moss 1997. Op.cit. 8. González, A.S., N.J. Camargo, P.L. Castellanos, G. Gonzalvez, M. Perdomo, M.R. Grillo, A. Romero. S/A. Op.cit. �9. NOM-093-SSA1-1994. Preparación de alimentos que se ofrecen en establecimientos fijos, especificaciones sanitarias. Diario Oficial de la Federación .Gobierno constitucional de los estados unidos mexicanos. México D.F. 10. Doyle, P.M., R.L. Beuchat y T.J. Montville 2001. Microbiología de los alimentos. Fundamentos y fronteras. 1ra. Edición. Editorial Acribia, Zaragoza, España. 69 11. Fernández, E.1981. Microbiología sanitaria: agua y alimentos. Vol. I Universidad Guadalajara, México D.F. p 175. 12. Salmonella spp. Center of Food Safety & Applied Nutrition, U.S. Food & Drug Administration. (FDA).http://www.cfsan.fda.gov/~mow/chap1.html 13. Chávez-dela Peña, M.E., A.L. Higuera-Iglesias, M.A. Huerta-Jiménez, R. Baéz-Martínez, J. Morales-León, F. Arteaga-Cabello, M.S. Rancel-Frausto, S. Ponce de León-Rosales. 2001. Brote por Salmonella enteritidis en trabajadores de un hospital. Salud Pública de México. Vol. 43:211-216 14. Gutierrez-Cogco, L., E. Montiel-Vazquez, P. Aguilera-Perez, M.C. y González-Andrade 2000. Serotipos de Salmonella identificados en los sistemas de salud en México. Salud Pública México. 42:490-495 15. Anuario Estadístico de la Secretaría de Salud. 2002. Op.cit. 16. Staphylococcus aureus. Center of Food Safety & Applied Nutrition, U.S. Food & Drug Administration. (FDA). http://www.cfsan.fda.gov/~mow/chap3.html 17. Torres V. M. R. y A. A. Castillo. 2002. Agentes patógenos transmitidos por alimentos. Volumen II. UNIVERSIDAD DE GUADALAJARA., Guadalajara, Jalisco México. 18. Bálcazar, L., M.A. Bueno 1996 . Estudio de la intoxicación por contaminación alimentaria en la Ciudad de Chihuahua, Mayo de 1996. Enfermedades Infecciosas y Microbiología. Vol 16 N0. 6: 271-274 19. Vibrio parahaemolitycus. Center of Food Safety & Applied Nutrition, U.S. Food & Drug Administration. (FDA). http://www.cfsan.fda.gov/~mow/chap9.html 20. DePaola, A.,J.L. Nordstrom, J.C. Bowers, J.G. Wells and D.W. CooK. 2003. Seasonal abundance of total and pathogenic Vibrio parahaemolyticus in Alabama oysters. Appl. Environ. Microbiol. 69:1521-1526. 21. DePaola, A., C.A. Kaysner, J. Bowers and D.W. CooK. 2000. Environmental investigations of Vibrio parahaemolyticus in oysters after outbreaks in Washington, Texas, and New York (1997 and 1998). Appl. Environ. Microbiol. 66:4649-4654. 22. DePaola, A.,J.L. Nordstrom, J.C. Bowers, J.G. Wells and D.W. CooK. 2003. Op.cit. 23. Guerrero, B. C. O. 2002. Monitoreo de Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus y V. vulnificus presentes y causantes de Intoxicación por consumo en productos marinos en las costas del estado de Tamaulipas. Sperctro Q Revista de las carreras de ciencias químicas. Vol. 4, No. 4http://www.une.edu.mx/mod2003/publicaciones/spectro_q_2004.doc 24. Franco-Monstreal, J., J.J. Flores-Abuxapqui, G.J. Suárez-Hoil, M.A. Puc-franco, M.R. HerediaNavarrete y M.L. Vivas-Rosel.2003. Prevalencias de las especies de Vibrio hollisae, V. mimicus y �V. vulnificus en alimentos marinos de origen animal de marisquerías de la ciudad de Chetumal, Quintana Roo, México. Revista Salud Pública y Nutrición. Vol. 4 No. 1http://www.uanl.mx/publicaciones/respyn/iv/1/articulos/vibrio.html 25. Vibrio vulnificus. Center of Food Safety & Applied Nutrition, U.S. Food & Drug Administration. (FDA).http://www.cfsan.fda.gov/~mow/chap10.html 26. Cornejo-Juárez, P., A.L. Rolón-Montes de Oca, J.C. Tinoco-Favila y J. Sifuentes-Osornio 2000. Septis fulminante por Vibrio vulnificus. Serie de Casos. La Revista de Investigación Clínica Vol. 52 No. 6: 632-637 27. Departamento de Física UNISON. http://www.fisica.uson.mx/Clima/cib_temp.html 28. NOM-110-SSA1-1994. Preparación y dilución de muestras de alimentos para su análisis microbiológico. Diario Oficial de la Federación. Gobierno constitucional de los estados unidos mexicanos. México D.F. 29. NOM-092-SSA1-1994. Método para la cuenta de organismos mesofílicos aerobios. Diario Oficial de la Federación. Gobierno constitucional de los estados unidos mexicanos. México D.F. 30. NOM-111-SSA1-1994. Bienes y servicios. Método para la cuenta de mohos y levaduras en alimentos. Diario Oficial de la Federación. Gobierno constitucional de los estados unidos mexicanos. México D.F. 31. NOM-112-SSA1-1994. Determinación de bacterias coliformes técnica del número más probable. Diario Oficial de la Federación. Gobierno constitucional de los estados unidos mexicanos. México D.F. 32. NOM-115-SSA1-1994. Método para la determinación de Staphylococcus aureus en alimentos. Diario Oficial de la Federación. Gobierno constitucional de los estados unidos mexicanos. México D.F. 33. NOM-114-SSA1-1994. Método para la determinación de Salmonella en alimentos. Diario Oficial de la Federación. Gobierno constitucional de los estados unidos mexicanos. México D.F. 34. NOM-031-SSA1-1993. Productos de la pesca, moluscos bivalvos frescos refrigerados y congelados. Especificaciones sanitarias. Diario Oficial de la Federación. Diario Oficial de la Federación. Gobierno constitucional de los estados unidos mexicanos. México D.F. 35. NOM-093-SSA1-1994. Op.cit. 36. NOM-121-SSA1-1994. Bienes y servicios. Quesos frescos, madurados y procesados. Especificaciones sanitarias. Diario Oficial de la Federación. Gobierno constitucional de los estados unidos mexicanos. México D.F. 37. Carrascal, A., G. Arrieta y S. Máttar 2002. Estudio preliminar de la calidad microbiológica de los alimentos en la Costa Atlántica Colombiana. Informe Quincenal Epidemiología Nacional Vol 7 No.11:163-169 38. Caballero Torres, A., J.A. Carrera Vara y M.E. Lengomín Fernández. 1998. Evaluación de la vigilancia microbiológica de los alimentos que se venden en las calles. Revista Cubana Alimentación y Nutrición Vol 12 No 1: 7-10 �39. Idem 40. Carrascal, A., G. Arrieta y S. Máttar 2002. Op.cit. 41. Lengomín Fernández, M.E., A. Caballero Torres, P. Monterrey Gutiérrez y J. Arcia Torres. 1997. Riesgos en la venta de alimentos en la calle. Revista Cubana Alimentación y Nutrición Vol 11 No 2: 79-83 42. Arrendo A., J. Bellido, M.R. Pac, J. Criado, M.A. Usera, I. Mesanza, F. Gonzélez, R. Pérez y J.M. Cortés 1998. Brotes epidémicos de salmonelosis por consumo de huevos. Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica. Vol. 16 No. 9:408-412 43. Staphylococcus aureus. Op.cit. 44. Boletín Epidemiológico 2003 y semana 17 del 2004. Subdirección de Epidemiología. Instituto de Salud del Estado de México. 45. DePaola, A.,C.A. Kaysner, J. Bowers and D.W. CooK. 2000. Op.cit. 46. DePaola, A.,J.L. Nordstrom, J.C. Bowers, J.G. Wells and D.W. CooK. 2003. Op.cit. 47. Franco-Monstreal, J., J.J. Flores-Abuxapqui, G.J. Suárez-Hoil, M.A. Puc-franco, M.R. HerediaNavarrete y M.L. Vivas-Rosel.2003. Op.cit. �EXPRESSION OF HIV TYPE 1 GLYCOPROTEIN 120 FROM A MEXICAN AIDS PATIENT IN A BACULOVIRUS SYSTEM Gerardo Ramos-Alfano, Patricia Tamez-Guerra, Lydia Rivera-Morales, Reyes Tamez-Guerra, Ricardo Gomez-Flores, and Cristina Rodriguez-Padilla Departamento de Microbiología e Inmunología, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma de Nuevo León, (Nuevo León, México) E-mail. patamez@uanl.mx Introduction Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS) is the result of the pandemic human immunodeficiency virus (HIV) infection, for which effective surveillance, diagnostic and treatment are required. AIDS/HIV has become a serious public health problem worldwide, with psychological, social, ethical, political, and economical involvement. It was estimated that 14,000 individuals became daily infected with HIV during 2003 (1). Because we do not have an effective vaccine against HIV yet, is important to evaluate different approaches to generate vaccines capable to stimulate a strong immune response, and thus serve as prophylactic and therapeutic measures against the AIDS disease. In order to be approved as a vaccine, the immunogenic compound must be demonstrated to be safe and effective, in addition to induce a long-term immune response and/or prevent the infection process. HIV proposed vaccines can be divided into five categories, based on the production methodology: i) synthetic peptides or peptidic sub-units, ii) live recombinant vectors, iii) alive attenuated vaccines, iv) inactivated complete particles, and v) DNA vaccines (2). Synthetic peptides or peptidic sub-unit protein-based vaccines have small viral peptides or pieces of viral peptides. These antigenic subunits can be produced using genetic engineering in bacteria, yeasts, mammal cells or baculovirus (3). The HIV envelope protein might become the most important target, because it attaches to the human cell and allows the viral DNA entrance. HIV envelope glycoproteins, particularly the gp120, have been reported as good candidates for vaccine production (4). The insect culture cell-baculovirus expression vector system (IC-BEVS) has been used as a recombinant protein production system. It has advantages over other systems including low-cost production, safety for mammals, and simple to scale up. In addition, it is possible to use it for complex post-traductional processes, such as the O-glycosilation and N-glycosilation, among others (5). To date, 16 recombinant protein productions using IC-BEVS have been recognized, and represent almost half of the products obtained with recombinant DNA technology approved for application as commercial products (6). In Mexico, new HIV-1 subtype B sequences, isolated from Mexican AIDS patients, have been reported (7). In order to produce a peptide with potential as a vaccine, we decided to use the gp120 isolated from a Mexican AIDS patient, and expressed in IC-BEVS. Materials and Methods �Glycoprotein gp120 isolation The pro-viral DNA from two HIV sero-positive patients (confirmed by ELISA and western blot), was isolated using a QIAGEN system (Qiamp blood, Qiagen Chatsworth, CA., USA), according to supplier´s instructions. Isolated gp120 DNA from Mexican patients (referred as patients # 18 and # 69), and the reference plasmid HXB2 were amplified using a nested PCR. For this, we selected the primers ED3 and ED14 reported by Delwart et al. (8), to obtain a 2,000 bp, a second reaction using the first reaction product as template, with the specific gp120 designed primers gpF 5’ GTC GAC GCC ACC ATG AGA GTG AAG GAG AAA TAT CAG C 3’ and gpR 5’ CTA TCT TTT TTC TCT CTG CAC CAC TCT TCT 3’. The 1,532bp products were cloned using the TOPO TA Cloning system (Invitrogen, CA), following the manual instructions (9). The cloning resulting plasmids were characterized using a restriction analysis with the EcoRI (1U/mgr, Promega, WI, USA) and KpnI (1U/mgr, Promega) endonucleases by 12 h. Then, the gp120 sequences were extracted from the plasmids using the SalI (1U/mgr, Promega) and EcoRI restriction enzymes by 12 h. The extracted gp120 sequences were then used to be subcloned in a pFastBac1 plasmid, following the Bac-toBac baculovirus expression system (Invitrogen, CA) (10). Subcloning of glycoprotein gp120 sequence in pFastBac1 The pFastBac1 donor plasmid has the advantage of that the protein sequence to be expressed is linked to a multiple cloning site (MCS), which is regulated by the polihedrin promoter pPolh. The promoter pPolh has two specific and interchangeable small elements (mini-Tn7), to each side of MCS, which have the role to integrate the cassette of foreign gene (gp120) to the baculovirus genome, by site-directed transposition (11). In order to linearise the pFastBac1 plasmid, we used EcoRI and SalI (1U/mgr, Promega) to allow linking of the gp120 plasmid sequences with the use of T4 DNA-ligase enzyme (12). To multiply the plasmid numbers we used alpha transformation; resulting plasmids were characterized using restriction analysis with EcoRI and SalI endonucleases. Recombinant vector construction The thermal shock ultra-competent transformation bacteria, DH10Bac, have a bMON14272 bacmid (AcMNPV baculovirus genome) (13). This bacmid contains a mini-F replicon with small number of copies, a kanamycine resistance gene, and a DNA segment which codifies the lacZ cloning vector based on pUC (14). The N-end of lacZ gene is a short segment that contains the union sites to Tn7 transposon; these sites do not alter the peptide lecture frame. They also have the pMON7124 plasmid, which acts as co-operator plasmid. This plasmid has tetracycline resistance and trasposase genes (15), and induces the recombination by site-directed transposition to the miniattTn7 pFastBac1 sites, to the bacmid miniTn7, from the gene group found among them (16). For this, E. coli DH10Bac was transformed with the pFactBac1 containing either the Mexican patient or the HXB2 gp120 sequence. Plasmid transposition to bacmid was stimulated by the addition of tetracycline and gentamicine to the media culture. After this, bacmids were isolated by minipreps for characterization (17). Recombinant vector analysis The chromogenic substrate (X-gal) and its IPTG inductor in the bacterial media culture, facilitate the phenotypic identification of the bacterial colony growth if a transposition event expression occurred (18). Based on this, white-coloured colonies were selected for the recombinant vector isolation, due that those were incapable to produce β-galactosidase, which unfold the X-gal, generates a blue-coloured colonies. For the nested PCR analysis, ED3 and ED14 internal HIV-1 gp120 primers were used, whereas ED5 and ED12 were utilized in a second reaction to amplify the C2-V5 region (1200 bp) (19). PCR-antibiotic positive clone isolates were phenotypically analyzed by using both kanamicine(+), and ampicilline(-). Clones were then confirmed with positive transposition using a �specific PCR with the universal primer M13F bond to the bacmid and the internal gp120 ED12, as reported previously (20). In vitro Sf9 insect cells transfection The recombinant viral genome transfection of the two described gp120 bacmids and controls, was performed in triplicate, as previously described by Invitrogen (21). Transfection samples were prepared using non-encapsulated viral DNA, liposome encapsulated viral DNA, empty liposomes, and entrapped DNA-suspension buffer (TE buffer, 10mM Tris-Cl, 1mM EDTA, pH 7.4) in liposomes. Transfection was done by using 2 ml SF900II culture media containing 9 x 105 Sf9 insect cells, showing 97% viability, in 6-well sterile ELISA microplates (22). One mililiter transfection mixture was then added to all wells, and incubated 5 h at 27ºC. After that, mixture was removed, and SF900II fresh medium was the added to all wells. Plates were incubated 72 h at 27ºC and supernatants were collected in 15-ml centrifuge tubes. Tubes were then centrifuged 10 min at 4,000 rpm, and supernatant and pellet were independently kept at 4°C in dark until use inI immunodetection analysis. Detection of gp120 in Sf9 cells The cellular pellets obtained from the transfection process described above, were used to detect the recombinant gp120. For this, cellular pellets were subjected to sodium dodecyl sulphate (SDS) 8% polyacrilamide-gel electrophoresis (PAGE), and were electrophoretically transferred to nitrocellulose membranes, for Western blot immunodetection analysis. To identify the recombinant gp120, a murine monoclonal antibody gp120 anti-HIV-1 IgG1 isotype, from P4D1-A7-F3 hybridome clone (Chemicon International, CA, USA), and a murine anti-IgG conjugated to peroxidase were used in Western blot analysis, and were detected with luminol by chemiluminescence (ECL Western Blotting Analysis System, Amersham Biosciences, London, England), and hydrogen peroxide hydrolysis by chemical reaction with carbazole (23). Results Glycoprotein gp120 isolation DNA samples from two Mexican AIDS patients (# 18 and # 69), and HXB2 plasmid DNA were amplified to obtain the gp120 sequences. For analysis, we selected one of the patients´s (# 69) amplified Gp120 DNA, for its obtained amount and integrity (Figure 1). PCR products were cloned in the pCR2.1 TOPO plasmid and then they were characterized by restriction analysis using EcoRI and KpnI. Ten E. coli colonies were tested with each DNA product (Mexican patient and HXB2). �Figure 1. Nested PCR reaction with the amplification of the HIV-1 gp120. One percent agarose electrophoresis gel stained with ethidium bromide. Lane 1, 100bp molecular weight markers, lanes 2, 3 and 4, nested PCR HIV-1 gp120 products from two Mexican patient samples (18 and 69) and the positive control HXB2, respectively. Colonies showing the presence of a 1,532 pb insert, corresponding to gp120 carrying plasmids, were selected and plasmids were identified as pTTA-120-69-3 and pTTA-120-HX-9 for Mexican patient and HXB2, respectively. Gp120 subcloning in pFastBac1and vector construction pTTA-120-69-3 and pTTA-120-HX-9 plasmids were used to be subcloned in pFastBac1 vector. After subcloning and transforming in E. coli, ten colonies were selected for each plasmid which might contain the gp120 insert. EcoRI and SalI restriction enzyme analysis revealed that pFB1-HX-5 and pFB1-HX-10 plasmids obtained from reference HXB2 actually have the gp120 insert, as well as pFB1-69-5, from the Mexican patient (data not shown). Recombinant vector analysis Detection of the recombinant vector after the DH10Bac bacterial transformation with pFB1-HX-5 and pFB1-HX-10 plasmids and transposition induction were performed using phenotypic and genotypic analysis. Nested PCR to detect the C2-V5 region from the gp120 was used to the first recombinant vector detection. PCR results detected eight E. coli strains with the presence of presumptive positive bacmids, Bac-HX-1, Bac-HX-2, Bac-HX-3, Bac-HX-4, Bac-HX-6, Bac-69-1, Bac-69-5, and Bac-69-6, which may contain the gp120 sequence, because they were capable to amplify a 1,200 bp product. Strains with a positive gp120 bacmid were selected to perform two phenotypic analyses to detect the integrity of the lacZ reporter gene, which confers a blue strain to the E. coli colony, and the kanamycine resistance conferred by the bacmid (Figure 2a). Results showed that strains Bac-HX-3, Bac-HX-4, Bac-HX-6 and Bac-69-1, had the lecture frame for βgalactosidase gene interrupted by the gp120 gene, thus indicated by white-stained E. coli colonies, and suggesting that it was highly possible to have the gp120 insert by transposition. In addition, all the strains were shown to grow in a culture medium supplemented with kanamycine, suggesting the presence of the antibiotic resistance gene. Based on these results, a second phenotypic analysis was used to guarantee the absence of the donor plasmid, which confers resistance to ampicilline. Selected strains were inoculated in a culture media containing ampicilline. Ampicillinesusceptible strains Bac-HX-4 and Bac-69-1 (Figure 2b) were then selected for the transfection process. �(a) (b) Figure 2. Phenotypic analysis of pFastBac-1 transformed Escherichia coli DH10Bac, using the HIV-1 gp120 DNA sequences from the AIDS patient # 69, and the HXB2 control. E. coli strains were grown in (a) LB agar supplemented with kanamycine (100μg/ml), 40µL of IPTG (100mM) and 40µL of X-Gal (40mg/mL), and (b) LB agar supplemented with ampicilline (100μg/ml), as explained in the text. 1, Bac-HX-1; 2, Bac-HX-2; 3, Bac-HX-3; 4, Bac-HX-4; 5, Bac-HX-6; 6, Bac-69-1; 7, Bac-69-5; 8, Bac-69-6. In vitro Sf9 insect cells transfection Baculovirus transfection using the Bac-HX-4 and Bac-69-1 recombinant strain bacmids was performed as described above. The first transfection mixture had the recombinant baculovirus genome (Bac-HX-4 or Bac-69-1) encapsulated in liposomes, and was capable to generate a cytopathic effect on Sf9 insect cell culture. None cytopathogenic effect was observed with insect cell culture exposed to other transfection mixture treatments. Detection of gp120 in Sf9 cells Bac-HX-4 and Bac-69-1 cellular pellets were subjected to Western blot analysis for gp120 detection. Western blot analysis using chemiluminescence (luminol) or an enzymatic reaction (peroxidase) revealed the gp120 production by the transfected insect cells (Fig. 3). Supernatants collected from the transfected cells were also shown to contain the gp120-recombinant baculovirus. �Figure. 3. Detection of the HIV-1 gp120 (patient # 69) in Sf9 insect cells infected with recombinant AcMNPV, carrying the Bac-69-1 and Bac-HX-4 bacmids, using Western blot analysis. (a) Immunodetection by a chemiluminescence reaction with luminal and anti- HIV-1 gp120 mouse IgG1, and (b) immuno-detection by enzymatic reaction based on hydrogen peroxide hydrolysis using an anti IgG mouse-peroxidase conjugate Discussion The recombinant protein production using the IC-BEVS system has the advantage over E. coli,Staphylococcus aureus, yeast or mammal cells, to produce a high-expression level product, as well as being the only approved system to test in clinical trials by the food and drug administration (FDA) agency (The Recombinant Protein Handbook, Amersham Biosciences, UK). It is possible to develop post-traductional process for the protein maturation, as N- and O-glycosilation, phosphorilation, fatty acid acylation, α-amidation, N-end amidation, carboxymethylation, isoprenylation, trucked signed peptide, proteolytic cut site, by using the IC-BEVS system (24). In the present study, it was possible to express the gp120 HIV-1 glycoprotein using the IC-BEVS system. To achieve this, two recombinant baculovirus were constructed, both showing the HIV-1 gp120 recombinant protein, with differences in the DNA source (Mexican AIDS patient and HXB2 reference plasmid). In recent years, IC-BEVS system has been selected to express and produce recombinant proteins from several animal viruses including canine and swine parvovirus, classic swine pest virus, or the African equine pest virus (25). Also, it has been possible to express viruslike particles, such as the blue tongue, which is very immunogenic. Using the IC-BEVS, it was only possible to produce a classic swine pest virus sub-unit vaccine, with the gp55 glycoprotein. Gp55 induces neutralizing antibodies capable to confer protection against the wild-type virus infection (26). Other examples of medical-clinical impact of the recombinant protein production using IC-BEVS, are the immunogenic hepatitis-B virus surface antigen (27), the hepatitis-C virus NS3 protease (28), and the antigen associated to HCA587 hepatocellular carcinoma (29). The bovine diarrheic virus gp48 and gp53 glycoproteins, which showed similar immune response to the native virus (30), and the growth human hormone (31) and the interferon-β (32), are other examples of the versatility of the IC-BEVS system for vaccine or medical drugs production. We selected the IC-BEVS system for its potential for recombinant protein production to be used as a vaccine (33). We used Mexican AIDS patient DNA samples to produce the recombinant gp120 because they have shown some differences compared with the HIV-1 subtype B found in America (34). We believe that a the Mexican DNA sequence will produce a immunogenic glycoprotein useful for the Mexican population. Recently, different strategies for the production of a safe HIV-1 immunogenic compound have been reported, many of which are based on the structural viral subunits, with either the gp160 (which is the virus env gene translation product), or with the gp120 (excision gp160 �product), which directly binds l to CD4 cell receptor (35). Furthermore, clinical trials have been conducted by VaxGen, Corp. (AIDSVAX MN and AIDSVAX B/B), using HIV-1 subtype B immunogens, and currently in phase II; Chiron Co. in Thailand who uses CM235/SF-2, a gp120 obtained from HIV-1 subtypes B and E, which is phases I and II; and Aventis-Pasteur (USA) who uses THO23/LAI-DID, a gp160 obtained from HIV-1 subtypes B and E, which is phases I and II (36). An important goal of the present study was the selection of the glycoprotein subunit from a Mexican patient which was able to be expressed in IC-BEVS system. Considering AIDS as one of the most important social health problems in the world, each country must attempt to produce an effective and safe vaccine against its ethnical HIV virus strain (37). It has been suggested that an optimum immune response against HIV-1 can be achieved after treatment with the gp120 which still carries the carbohydrates resulting from the post-traductional processes. One reported study revealed a limited immune response after the treatment with the wild-type gp160 modified at 4th, 5th and 6th Nglycosilation sites (38). It has also been reported that removal of the gp120 glycosilation conserved sites, did not improve the humoral immune response, whereas the loss of the carboxyl end significantly reduced the cytotoxic T lymphocyte efficacy against the virus (39). Other results have suggested that the effectiveness of the immune response not only depends in the post-traductional process, but also in the transfer process, because the immune response has been enhanced after some gp120 codon changes, producing a synthetic protein (40). The same study revealed that despite the cytoplasmic mRNA concentration is similar in the groups receiving the synthetic protein and the wild-type control, the first will generate a higher humoral and cellular immune response (41). We found that HIV-1 subtype B sequences registered in the genebank were different from those found in Mexican patient samples (42). We believed that it might be possible to have a different immune response based on the differences on codons. In fact, the compounds that are being tested in North America, Europe and Thailand, in phase III clinical trial, AIDSVAX B/B and AIDSVAX B/E described above, are the result of a recombinant gp120 bivalent preparation. The major problem observed with these vaccines is that they confer limited protection (43), which also prompted our present research using autochthonous recombinant gp120. In summary, we are reporting the construction of two recombinant baculovirus, using one reference (HXB2) and one Mexican patient DNA sequence from the foreign HIV-1 subtype B gp120 gene. We demonstrated the gp120 expression of both recombinant baculovirus in an IC-BEVS system using Western blot analysis. The production, purification and antigenic activity test, to validate the differences in immune response among the two recombinant gp120 glycoproteins, are being currently evaluated in our laboratory. Abstract The aim of the present study was the implementation of an insect cell-baculovirus expression vector system (IC-BEVS) for the expression of the human immunodeficiency virus (HIV) type 1 gp120 recombinant protein. For this, we isolated the DNA sequences from the gp120 protein from a Mexican AIDS patient, and from the reference plasmid HXB2, which were independently cloned in the plasmid pFastBac1. We used the plasmids to transform E. coli DH10Bac containing the AcMNPV baculovirus bMON14272 bacmid, and then induced a site-directed transposition to transfer the HIV-gp120 genome to the baculovirus´s bacmid. Baculovirus recombinant was detected using PCR analysis and colony phenotyping, with both the Bac-69-1 and the reference plasmid Bac-HX-4. The baculoviral naked genome was then encapsulated within liposomes to transfect the insect cell culture Sf9. Western blot analysis, developed by chemiluminescence and hydrogen peroxide hydrolysis was then utilized to identify the recombinant gp120 expression. Results demonstrated the generation of two recombinant baculoviruses expressing either gp120 from a Mexican AIDS patient or as reference plasmid. The potential of using the gp120 recombinant baculovirus as HIV vaccine in Mexico is discussed. �Key words: HIV, gp120, AIDS, Mexican patient, baculovirus, insect cell culture. Resumen El objetivo principal del presente estudio fue la implementación de un sistema vector de expresión en baculovirus en células de insecto (IC-BECS), para la expresión de la proteína recombinante gp120 del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH). Para esto, se aislaron secuencias de la proteína gp120 de una paciente mexicano con SIDA, y del plásmido de referencia HXB2, los cuales se clonaron en forma independiente en el plásmido pFastBac1. Posteriormente, se utilizaron estos plásmidos para transformar E. coli DH10Bac conteniendo el bacmido bMON14272 del baculovirus AcMNPV, para luego inducir una transposición sitio dirigida para transferir el genoma de gp120 del VIH al bacmido del baculovirus. Se detectó el baculovirus recombinante de Bac-69-1 (paciente) y el plásmido de referencia Bac-HX-4, utilizando la técnica de PCR y la fenotipificación de colonias. Después se encapsuló el genoma desnudo baculoviral en liposomas para su transfección al cultivo de células de insecto Sf9. Se utilizaron, además, análisis de Western blot (que se revelaron por quimioluminiscencia e hidrólisis de peróxido de hidrógeno) para la identificación de la expresión de la proteína gp120. Los resultados obtenidos demostraron la generación de dos baculovirus recombinantes que expresaron la gp120 del paciente mexicano de SIDA o el plásmido de referencia. Se discute el potencial de utilizar a los baculovirus recombinantes de gp120 como vacunas del VIH en México. Palabras claves: VIH, gp120, SIDA, pacientes Mexicanos, baculovirus, cultivo de células de insecto. Acknowledgments This study was supported in part by the Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología, Mexico, Grant # J-002-112-2000, and by University Autonomous of Nuevo Leon, Grant PAICYT # CN 705 References 1. Joint United Nations Programme on HIV/AIDS (UNAIDS)http://www.unaids.org/Unaids/EN/Resources/Epidemiology/epidemicupdateslides.asp 2003. 2. Heilman, C. 1998. Division of Acquired Immunodeficiency Syndrome. In The Jordan Report 98: Accelerated development of vaccines. B. Gellin, editor. Division of Microbiology and Infectious Diseases, National Institute of Allergy and Infectious Diseases, National Institutes of Health. USA. 95-113 3. Idem. 4. Idem. 5. Palomares, L.A., F. Kuri-Breña, and O.T. Ramirez. 2002. Industrial recombinant protein production. In D. Al Gobaisi , editor. The Encyclopedia of the life support systems EOLSS Publishers Co. LTD, UK.1-48. 6. Idem. 7. Rivera-Morales,L.G., V.A. Novitsky, J.R. Trujillo, C. Lavalle-Montalvo, C. Cano-Dominguez, J. Ramos-Jimenez, E. Jimenez-Rios, L. Flores-Flores, P. Lopez-Guillen, P. Gilbert, F. Vannberg, R.S. �Tamez-Guerra, C. Rodriguez-Padilla, and M. Essex. 2001. The Molecular Epidemiology of HIV Type 1 of Men in México. AIDS Res Human Retroviruses. 17(1); 87 - 91. 8. Delwart, E. L., E.G. Shaper, J. Louwagie, F.E. McCutchan, M. Grez, H. Rubsamen-Waigmann, and J.I. Mullins 1993. Genetic relationships determined by a DNA heteroduplex mobility assay: analysis of HIV-1 env genes. Science. 262:1257-1261. 9. Invitrogen Life Technologies. 2002. Instruction manual of HTP TOPO TA Cloning Kit. Version D. USA. 10. Invitrogen Life Technologies. 2002. Instruction manual of Bac-to-Bac baculovirus expression system Version C. USA. 11. Idem. 12. Idem. 13. Luckow, V. A., S. C. Lee, G.F. Barry, and P.O. Olins 1993. Efficient generation of infectious recombinant baculoviruses by site specific transposon-mediated insertion of foreign genes into a baculovirus genome propagated in Escherichia coli. J. Virol. 67: 4566-4579. 14. Idem. 15. Idem. 16. Idem. 17. Sambrook, J., E.F. Fritsch and T. Maniatis 1989. Molecular cloning: a laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press. USA. Ap.13.2-1.34. 18. Luckow, V. A., et.al., Op.cit. 19. Rivera Morales, L.G., et.al., Op.cit. 20. Idem 21. Invitrogen Life Technologies. 2002., Op.cit. 22. Idem. 23. Sambrook, J., and D.W. Russell 2001. Molecular Cloning: a laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press. USA. Ap. A.8.54. 24. Gooche, C. F., M.J Gramer,. D.C Andersen,. J.B Bahr,.and J. Rasmussen 1991. The oligosaccharides of glycoproteins. Biotechnology 9:1347-1355. 25. Sánchez-Vizcaíno, J.M. 2001. Digital course of immunology and disease in farm animals. Universidad Complutense de Madrid. ISBN: 84-699-4740-0. http://www.sanidadanimal.info. 26. Idem. �27. Miao, J., X. Cong, and W. Tan 1998. Rapid construction of recombinant baculovirus carrying hepatitis B virus surface antigen gene by using a novel baculovirus shuttle vector (Bacmid). Zhonghua Shi Yan He Lin Chuang Bing Du Xue Za Zhi. 12:245-248. 28. Hou, L. H., G.X. Du, R.B. Guan, Y.G. Tong and H.T. Wang 2003. In vitro assay for HCV serine proteinase expressed in insect cells. World J. Gastroenterol. 9:1629-1632. 29. Li, B., H.Y. Wu, X.P. Qian, Y. Li, and W.F. Chen. 2003. Expression, purification and serological analysis of hepatocellular carcinoma associated antigen HCA587 in insect cells. World J. Gastroenterol. 9:678-682. 30. Chimeno-Zoth, S., O. Taboga, G. König, A. Pereda, E. L. Palma and M. E. Piccone. 2001. Expresión y caracterización de dos proteínas estructurales del virus de la diarrea viral bovina (VDVB). Rev. Arg. Microbiol.. 33:33-38. 31. Geng, Z. H., Y. Liu, P. Gao, D.M. Zhao, S. Li, X.D. Yu and B.Z. Zhang 2002. Enhancing hGH expression level in insect cells by shortening the 5'-UTR of hGH cDNA. Sheng Wu Gong Cheng Xue Bao. 18:505-508. 32. Smith, G.E., M.D. Summers and M.J. Fraser 1983. Production of human b-interferon in insect cells infected whit a baculovirus expressions vector. Mol Cell Biol. 3:2156–2165. 33. Heilman, C. 2002. Human Immunodeficiency Virus (HIV) disease. In The Jordan Report: 20thAnniversary, Accelerated development of vaccines 2002. S. Landry, editor. National Institute of Health, US Department of Health and Human Services, USA. 126-131. 34. Rivera Morales, L.G., et.al., Op.cit. 35. Heilman, C., Op.cit. 36. Idem. 37. Idem. 38. Reitter, J. N., R.E. Means and R.C. Desrosiers 1998. A role for carbohydrates in immune evasion in AIDS. Nat. Med. 4:679-684. 39. Chakrabarti, B. K., W. Kong, B. Wu, Z.Y. Yang, J. Friborg, X. Ling, S.R. King, D.C. Montefiori and G.J. Nabel 2002. Modifications of the Human Immunodeficiency Virus envelope glycoprotein enhance immunogenicity for genetic immunization. J. Virol. 76:5357-68. 40. André, S., B. Seed, J. Eberle, W. Schraut, A. Bultmann and J. Haas 1998. Increased immune response elicited by DNA vaccination with a synthetic gp120 sequence with optimized codon usage. J. Virol. 72:1497-1503. 41. Idem. 42. Rivera Morales, L.G., et.al., Op.cit. 43. Tramont, E.C. and M.I. Johnston, M.I. 2003. Progress in the development of an HIV vaccine. Expert Opin Emerg Drugs. 8:37-45. ��GASTO ENERGÉTICO EN ESCOLARES ADOLESCENTES DE LA CIUDAD DE MONTERREY, N. L. MÉXICO. Oswaldo Ceballos Gurrola*, Enrique Serrano Ostaríz**, Enrique Sánchez Oríz*** y Javier Zaragoza Casterad**** *Facultad de Organización Deportiva, Universidad Autónoma de Nuevo León. (Nuevo León, México). ** Departamento de Fisiatría y Enfermería, Universidad de Zaragoza (España) *** Departamento de Bioestadística, Universidad de Zaragoza (España) **** Facultad de Educación Física y Salud, Universidad de Zaragoza (España) E-mail: oscegu@hotmail.com Introducción La sociedad mexicana debe ser consciente de incorporar a los jóvenes a la realización de algún tipo de actividad física, contribuyendo en un completo desarrollo personal y mejor calidad de vida; sin embargo, cada día vemos como las nuevas tecnologías van absorbiendo el tiempo libre de los adolescentes (uso de videojuegos, computadoras, televisión,...), si a esto le aunamos la mala calidad de los alimentos que se consumen a estas edades, daría como resultado un elevado número de personas sedentarias, con sobrepeso y baja condición física. La actividad física que realizan los adolescentes en su vida diaria es el equivalente al gasto energético en kcal/kg/día; a menudo nos preguntamos si éste es suficiente para promover hábitos de ejercicio físico que perduren en su vida futura. Los elementos generados por la actividad física son (1): el movimiento corporal a través del músculo esquelético, el generar un gasto energético, la energía gastada (kilocalorías) varía continuamente, y la positiva correlación con la condición física. En el sector educativo, se proponen tres aspectos para desarrollar la actividad física: a) reforzar la educación física en las escuelas; b) crear vínculos entre la actividad física y el deporte dentro y fuera del contexto escolar, y c) desarrollar medios para asegurar que todo el alumnado participante pueda progresar (2). Con relación a la salud, existe mucha información sobre los beneficios de la actividad física especialmente en los adultos. Algunos autores (3,4,5) señalan que la práctica de la actividad física casi siempre es beneficiosa al mejorar el rendimiento de casi todos los sistemas: cardíaco, vascular, respiratorio, músculo esquelético, digestivo, endocrinológico y neurológico. Varios investigaciones coinciden en señalar que una parte importante de la población y en especial los adolescentes tienen bajos niveles de actividad física en su vida diaria (6,7,8,9,10). En este sentido en México, no es la excepción, ya que los hábitos deportivos de los mexicanos según datos de la Comisión Nacional del Deporte señalan que: - El 80 % de los niños y jóvenes no realizan actividades físicas suficientes para alcanzar los niveles mínimos de desarrollo físico. - Menos del 7 % de la población mayor de 15 años realiza alguna actividad física o deporte que sea significativo para su salud. - Los hábitos de actividad física y deporte de los mexicanos se reducen como mucho a una hora, un día a la semana de promedio. - Existen pocos programas de recreación e integración familiar basados en la actividad física. �- No se cuenta con los espacios suficientes y adecuados para que la comunidad tenga acceso a la actividad física, la recreación y el deporte; los existentes están inoperantes o infrautilizados. Considerando lo antes expuesto y con la inquietud de saber como se encuentran la juventud en Monterrey (Nuevo León, México), realizamos el presente estudio con el propósito de analizar la actividad física a través del gasto energético medio en los escolares adolescentes de la ciudad de Monterrey según edad y genero. Metodología La muestra analizada está constituida por 396 estudiantes divididos en dos grupos de edad (12-14 y 15-17 años), pertenecientes a los centros escolares de secundaria (18 públicos y 3 privados) y preparatoria (13 públicos y 4 privados) de la ciudad de Monterrey. El cuestionario de actividad física utilizado es el “Four by one-day physical activity questionnaire” (11,12), dicho instrumento presenta una validez y confiabilidad aceptables, mide la actividad física total, registra tanto el gasto total de energía como los períodos de actividad física apropiada y determina los niveles de actividad física recogiendo información del día anterior, siendo el periodo de tiempo mejor recordado. Para conocer el índice de la actividad física de los escolares, nos basamos en el calculo del coste de energía diario en kcal/kg/día, multiplicando el tiempo empleado de una categoría de actividad por el valor en MET (equivalente metabólico) para esa categoría. Recordamos que un MET equivale a 1 kcal/kg/hora; p. Ej. realizar una actividad ligera (ver la televisión) por dos horas 2 x 1,5 = 3 kcal/kg/hora. Asimismo, nos apoyamos en unas tablas que reflejan el gasto de las diferentes actividades según su intensidad (13). - Dormir 1 MET - Actividades muy ligeras (AML) 1.5 METs - Actividades ligeras (AL) 2.5 METs - Actividades moderadas (AM) 4 METs - Actividades fuertes (AF) 6 METs - Actividades muy fuertes (AMF) 10 METs Procedimiento Previamente, se realizó una prueba piloto con el fin de adecuar, en alguna medida, el cuestionario adaptado transculturalmente al español (14) a la población de Monterrey; además, nos permitió comprobar otros aspectos relacionados con su administración. El cuestionario se aplicó en 4 ocasiones considerando el fin de semana - jornada escolar y el período de invierno – primavera durante un período de 6 meses de aplicación, con grupos de 10 escolares con el apoyo de un encuestador. �La primera vez que se responde al cuestionario el encuestador comienza leyendo las instrucciones y una a una las preguntas, al mismo tiempo los estudiantes las van contestando, así hasta que se logra comprender totalmente el mecanismo de llevarlo a cabo, para después continuar personalmente. Para el segundo, tercer y cuarto cuestionario las instrucciones son más concretas al conocer la mecánica de la cumplimentación, reduciendo el tiempo de contestación. Resultados Los datos obtenidos en el presente trabajo nos muestran que el gasto energético medio de la muestra de escolares adolescentes de la ciudad de Monterrey es de 37.52 ± 2.12 kcal/kg/día. Al comparar estos valores con estudios que han utilizado una misma metodología (Ver Figura 1) encontramos resultados similares con los escolares de la ciudad de Zaragoza (15), valores superiores respecto a los de Inglaterra (16) e inferiores a los de la Provincia de Teruel (17). Figura 1. Gasto energético medio (kcal/kg/día) en cuatro poblaciones de escolares. NS En la Tabla 1, observamos que existen diferencias significativas (p<0,05) respecto al gasto energético medio según la edad, siendo los valores más altos los del grupo de menos edad tanto en los hombres (38.37) como en las mujeres (37.60). Tabla 1. Gasto energético medio de la ciudad de Monterrey (Nuevo León, México) según edad. Genero Grupos de Edad G.e.m. Valor de P Hombres Mujeres 12-14 años 15-17 años 12-14 años 15-17 años n = 94 n = 99 n = 101 n = 102 38,37 ± 2,32 37,57 ± 1,93 37,60 ± 1,96 36,59 ± 1,93 0.010 0.000 �Con respecto al genero (Ver Tabla 2), encontramos que los hombres son más activos que las mujeres (p<0,05) en ambos grupos de edad, siendo varios los autores que presentan datos similares a los del presente trabajo (18,19,20,21,22,23). Tabla 2. Gasto energético medio (kcal/kg/día) de los escolares de la ciudad de Monterrey (Nuevo León, México) según género 12 – 14 años Edad Genero G.e.m. Valor de P 15 – 17 años Hombres Mujeres Hombres Mujeres n = 94 n = 101 n = 99 n = 102 38.37 ± 2.32 37.60 ± 1.96 37.57 ± 1.93 36,59 ± 1.93 0.014 0.000 Discusión Con estos datos podemos decir que los escolares de Monterrey se encuentran tipificados como “moderadamente activos e inactivos”, entendiéndola como una categoría aceptable; a pesar de este nivel alcanzado consideramos que las autoridades tanto deportivas, como educativas tienen la responsabilidad de proponer programas encaminados a la promoción del ejercicio físico, mediante actividades acordes a estas edades que conduzcan alcanzar niveles superiores. Otro aspecto a señalar, es que existen pocos espacios para la práctica deportiva con relación al número de habitantes y la mayoría de estos con instalaciones de mala calidad e insuficiente material didáctico y deportivo, por lo que resulta más difícil su desarrollo. Varios estudios señalan que la edad parece ser determinante con relación al nivel de actividad física realizada, donde los jóvenes de menos edad son los que hacen más actividad física (24,25,26,27). Nuestra investigación realizada en la ciudad de Monterrey, N.L. (México) coincide con estos autores, lo que nos lleva a promover un estilo de vida activo en cada una de las etapas de vida de las personas para lograr beneficios fisiológicos, psicológicos, sociales, preponderantemente. Los estudios realizados (28,29,30) muestran cómo las mujeres se implican más a la hora de realizar actividades físicas individuales, mientras que los hombres prefieren fundamentalmente actividades deportivas colectivas. Conociendo estas necesidades, se podría ofertar una variedad de actividades que conecten con los intereses y motivaciones de las mujeres para que de esta forma incrementen su actividad física y pueda equilibrarse con la de los hombres. En adolescentes argentinas (31) encuentran que las motivaciones para la práctica de actividades físicas varían según la clase social de pertenencia, están fuertemente influenciadas por el contexto familiar, las de familias deportistas o con antecedentes deportivos son más estimuladas para dichas prácticas y el gusto por el fútbol. Conclusiones Consideramos que el cuestionario de actividad física utilizado en el presente estudio, es un instrumento sencillo y válido para medir el gasto energético medio de los escolares. Los especialistas en actividad física (monitores de actividad física, profesores de educación física, …) pueden disponer de un método, poco utilizado hasta el momento, para detectar los diferentes �niveles de actividad física de sus alumnos y por consiguiente diseñar programas de ejercicio específicos para los diferentes grupos. La actividad física disminuye con la edad y en cuanto al genero los hombres presentan mayores niveles de actividad física que las mujeres, confirmando lo expuesto por diferentes autores. Existe en Monterrey un número importante de escolares con bajos niveles de actividad física. Casi la mitad de los escolares se han tipificado como inactivos y muy inactivos siendo un dato a tener en cuenta para la salud de los regiomontanos. Resumen Durante la adolescencia, los jóvenes adquieren la mayor parte de los hábitos (positivos y negativos) que condicionan su vida con relación a la salud. Por ello, es fundamental conocer los hábitos, entre otros, relacionados con la actividad física. Este trabajo tiene como objeto analizar la actividad física a través del gasto energético medio en los escolares adolescentes de Monterrey. La muestra analizada fue de 396 escolares, utilizando el cuestionario “Four by one-day physical activity questionnaire". Se concluyó que la actividad física disminuye con la edad y en cuanto al genero los hombres presentan mayores niveles de actividad física que las mujeres, confirmando lo expuesto por diferentes autores. Por otro lado, existe en Monterrey un número importante de escolares con bajos niveles de actividad física siendo un factor trascendente para modificar la calidad de vida de los escolares. Palabras clave: Actividad física, gasto energético, jóvenes estudiantes, Monterrey México Abstract During adolescence, young people acquire most of the habits (positive and negative) which condition their lives in relation to health. Because of this, it is fundamental to know the habits, among others, related to physical activity. This project has the objective of analizing the physical activity through the leveled use of energy in adolescents in Monterrey. The sample analized consisted of 396 scholars, using the four by one-day physical activity questionnaire. We concluded that the applied questionnaire for this study is simple and valid to measure the leveled use of energy in scholars. On the other hand, there are in Monterrey a great amount of students whose physical rate is low, being this a transcendental factor that modifies the quality of student lives. Key words: Physical activity, spend energy, young students, Monterrey México. Referencias 1. Caspersen, C. J., K. E. Powell y G. M. Christenson 1985. Physical activity, exercise and physical fitness: definitions and distinctions for health related research. Public Health Reports Vol. 100 No. 2: 126- 131. 2. Ogle, S. 1997. International perspectives on public policy and the development of sport for young people. En Canter M. A. y Devís J. La promoción de la actividad física relacionada con la salud en el ámbito escolar. Implicaciones y propuestas a partir de un estudio realizado entre adolescentes. Apunts Educación física y deportes No. 67: 54- 62. 3. Serra, J. R. 2001. Corazón y ejercicio físico en la infancia y adolescencia. Masson. pp 209 4. American College of Sports Medicine (ACSM) 1999. Manual ACSM para la valoración y prescripción del ejercicio. Paidotribo. pp. 412. �5. Paffenbarger, R. S. 1978. Physical activity, all cause mortality, and longevity of college alumni. Am. J. Epidemiol. No. 108: 161- 175. 6. Mendoza R. 1994. Conductas de los escolares españoles relacionados con la salud (19861990). Consejo Superior de Investigaciones Científicas. 7. Cale, L. 1994. Self-report measures of children's physical activity: recommendation for future development and a new alternative measure. Health Education Journal. No. 53: 439- 453. 8. Cantera, M. A. y J. Davís 2002. La promoción de la actividad física relacionada con la salud en el ámbito escolar. Implicaciones y propuestas a partir de un estudio realizado entre adolescentes. Apunts: Educación Física y Deportes. No. 67: 54- 62. 9. Castillo, I. y I. Balaguer 1998. Patrones de actividades físicas en niños y adolescentes. Apunts: Educación Física y Deportes. No. 4: 22- 29. 10. Ceballos, O. 2002. Actividad y condición física en escolares adolescentes de la ciudad de Zaragoza (España) y Monterrey (México). Tesis Doctoral. Universidad de Zaragoza. España. 11. Cale, L. 1993. Monitoring physical activity in children. Tesis doctoral. Loughborough University of Tecnology. Inglaterra. 12. Cantera, M. A. 1997. Niveles de Actividad Física en la Adolescencia. Estudio realizado en la población escolar de la provincia de Teruel. Tesis doctoral. Universidad de Zaragoza. España. 13. Ainsworth, B.A., W.L. Haskell, A. S. Leon, D. A. Jacobs, H. J. Montoye, J.F. Sallis, y R. S. Paffenbarger 1993. Compendium of physical activities: classification of energy costs of human physical activities. Medicine and Science in Sports and Exercise. Vol. 25 No. 1: 71- 80. 14. Cantera, M. A. 1997. Op. Cit. 15. Ceballos, O. 2002. Op. Cit. 16. Cale, L. 1993. Op. Cit. 17. Cantera, M. A. 1997. Op. Cit. 18. Mendoza R. 1994. Op. Cit. 19. Cale, L. 1994. Op. Cit. 20. Cantera, M. A. 1997. Op. Cit. 21. Castillo, I. y I. Balaguer 1998. Op. Cit. 22. Tercedor, P. 1998. Estudio sobre la relación entre actividad física habitual y condición físicasalud en una población escolar de diez años de edad. Tesis Doctoral. Universidad de Granada. España. 23. Piéron, M., R. Telama, L. Almond y F. Barreiro da Costa. 1999. Estilo de vida de jóvenes europeos: un estudio comparativo. Rev. de Educación Física. No. 76: 5-13 �24. Sallis, J. 1991. Self-report measures of children´s physical activity. Journal of School Health. Vol. 5 No. 61: 215- 9. 25. Howley, E. y B. Don Franks 1995. Manual del técnico en salud y fitness. Ed. Paidotribo. pp. 451. 26. Cervelló, E. 1996. La motivación y el abandono deportivo desde la perspectiva de las metas de logro. Tesis Doctoral. Facultad de Psicología. Universitat de Valéncia. España. 27. Piéron, M., R. Telama, L. Almond y F. Barreiro da Costa 1999. Op. Cit. 28. Devís, J. y C. V. Peiró 1992. El ejercicio físico y la promoción de la salud en la infancia y la juventud. Gac Sanit. Vol. 6 No. 33: 263- 268. 29. Devís, J. y C. Peiró 1993. La actividad física y la promoción de la salud en niños/as y jóvenes: la escuela y la Educación Física. Rev. Psicología del Deporte. No. 4: 71- 86. 30. Devís, J. y C. Peiró 1995. La salud en la enseñanza de la educación física: desarrollo y evaluación de una experiencia escolar. En Rodriguez P. L. Moreno J. A. (dir.) Perspectivas de actuación en educación física. Universidad de Murcia. No. 1: 61- 91. 31. Bianchi, S. y E. Brinnitzer 2000. Mujeres adolescentes y actividad física. Relación entre motivación para la práctica de la actividad física extraescolar y agentes sociabilizadores. http://www.efdeportes.com/Revista Digital - Buenos Aires - Año 5 - N° 26. �CUCARACHAS: BIOLOGÍA E IMPORTANCIA EN SALUD PÚBLICA Gustavo Ponce, Pedro C. Cantú*, Adriana Flores, Mohamed Badii, Artemio Barragán, Raúl Zapata e Ildefonso Fernández Facultad de Ciencias Biológicas (Universidad Autónoma de Nuevo León) *Facultad de Salud Pública y Nutrición (Universidad Autónoma de Nuevo León) E-mail: gponce@fcb.uanl.mx Introducción Las cucarachas pertenecen a uno de los grupos de insectos mejor conocidos y más antiguos; los organismos pertenecientes a este grupo, tienen la característica de adaptarse a una gran variedad de hábitat (1,2) (Ver Tabla 1). Las cucarachas aparecieron en el periodo cambriano y los registros fósiles más antiguos datan de 340 millones de años. Las cucarachas son consideradas como un grupo sinantropico debido a la estrecha relación existente con el hombre, la cual data desde que este último habitaba las cavernas. Actualmente se conocen cerca de 3,500 especies; siendo la mayoría de regiones tropicales (3,4). Presentan una gran variedad de formas, tamaños, colores y hábitat en los que subsisten, siendo solo unas cuantas las que representan importancia en salud pública; en la actualidad se conocen alrededor de 45 patógenos que pueden transmitir de manera mecánica, hallando principalmente bacterias, hongos protozoarios, helmintos y virus (5, 6, 7). Las cucarachas, presentan por lo general forma aplanadas dorsoventralmente y con tegumento liso, variando en color, desde un color café castaño hasta el negro en las especies que invaden las casas. Las antenas que presentan son filiformes y multiarticuladas. Las partes bucales son del tipo mordedor-masticador y el número de alas en general, es de dos pares, aunque en algunas especies se presentan de tipo vestigial; el par de alas externo es angosto, grueso y coriáceo, mientras que el primer par es de tipo membranoso y se pliega como abanico. (8) (Ver Figura 1) Descripción de la biología y hábitat de las especies de cucarachas El ciclo de vida de este grupo de Insectos, consta de tres etapas, huevo, ninfa (diversos estadios) y el adulto (Ver Figura 1). Los huevos de las cucarachas están acomodados en forma pareada, dentro de una cámara llamada oteca, la cual presenta forma de frijol y es de estructura coriácea, la cual puede ser expulsada o bien la hembra puede traerla consigo hasta la eclosión de las ninfas; en otras especies no hay formación de la oteca, ya que son ovovivíparas. El número de huevos varía según la especie (Ver Tabla 2). �Figura 1. Diferentes estadios de las cucarachas. a. oteca; b. ninfas; c. adultos Todos los estadios inmaduros pueden encontrarse agregados, en asociación con los adultos; en algunas especies como Blatella germanica y Periplaneta americana, una feromona de adherencia es la responsable de la agregación. Las cucarachas son omnívoras ya que se alimentan de una gran variedad de materiales, preferentemente que contenga almidón y azucares. Ingieren leche, queso, carnes, pasteles, productos de grano, azúcar, chocolate, dulce, entre muchos otros productos, de hecho, ningún material comestible que el hombre pueda ingerir esta exento de contaminación por estos insectos, que también se alimentan de cubiertas de libros, plafones de techo que contengan almidón, el forro interior de las suelas, sus propias exuvias, sus parientes muertos o heridos, sangre fresca o seca, excremento, esputo, uñas de las mano y pies, cadáveres y detritus alimentarios que se quedan impregnados en los niños, ocasionando en ellos una lesión local denominada herpes blattae. (9,10) Habitualmente regurgitan, a intervalos de tiempo, porciones de su alimento parcialmente digerido y dejan caer heces en donde quiera que concurran. También arrojan una secreción nauseabunda por la boca y por las aberturas glandulares del cuerpo, dando un olor persistente y típico, a los alimentos y objetos con las que se ponen en contacto. La mayoría de las cucarachas son plagas nocturnas ya que caminan y se alimentan por la noche y se esconden en lugares oscuros durante el día. Por lo tanto, muchas personas no están familiarizadas con sus hábitos alimenticios. En infestaciones altas estos insectos pueden verse durante el día moviéndose por fuera de sus escondites. Migraciones en masa como resultado de la sobrepoblación y que por lo general incluyen grandes cantidades de insectos, pueden ocurrir en especies como Blatella. germanica, Blatta orientales y Periplaneta americana; en ocasiones está recurre al vuelo además de caminar cuando invaden nuevas áreas. Varias especies son transportadas por el hombre de un lugar a otro, en muebles, aparatos domésticos, en cajas, entre otros objetos (11, 12). Tabla 1.- Descripción de la biología y hábitat de las especies de cucarachas de importancia en salud pública. Especies Cucaracha americana Biología y Hábitat Volador débil, prefiere la comida fermentada, se encuentra afuera y dentro de las casas, principalmente en climas calientes. Comúnmente en ciudades con sistema de Descripción y Deposición del huevo Color rojizo a café oscuro, 7/8 pulg, (10mm), de largo. Los dejan caer o los pegan en áreas calientes y �Periplaneta americana alcantarillado, dentro de estructuras de desagüé protegidas, cerca de la y en área perimetrales. comida. Cucaracha australiana Requieren alta temperatura y humedad, intolerable al frió. Principalmente se alimenta de materiales de plantas, es una plaga de jardín. De lo contrario similar a la cucaracha americana. Color café oscuro a negro, ½ pulg. (12mm), de largo. Con frecuencia lo depositan en grietas y hendiduras. Hábitos similares a la cucaracha americana. Comúnmente se encuentra a fuera de la casa, en áreas calientes y pretejidas. En sistemas de alcantarillado, normalmente se alimenta de materiales de plantas, es una plaga de jardín. Color café oscuro a negro, ½ pulg., (12mm), de largo. Los pegan a una superficie adecuada como el concreto y el yeso. Requieren calor pero menos humedad que la cucaracha alemana, Se encuentran solamente en el interior de las casas, se refugian por todo el edificio en áreas altas específicamente como el techo y marcos de pinturas (fotos). Color café rojizo, 2/16 pulg., (5mm), de largo. Los depositan bajo la superficie de estantes, muebles, etc. En grietas. Se encuentra dentro de las casas, en áreas calientes y húmedas. Prefieren las grietas, cerca de la comida y agua, en la cocina o en los baños. Prefieren esconderse en materiales de madera y papel o bien en equipo eléctrico, atracción al calor. Color café amarillezca, ¼ pulg., (6mm) de largo, Depositan en áreas protegidas con 1 ó 2 días de incubación. Prefieren áreas húmedas, temperatura abajo de los 84°f (29°c), toleran el frió. Comúnmente se encuentran a fuera de las casas, en sótanos, alcantarillado, desagües, alrededor de tuberías, en la pared terrazas vacías. Prefieren la comida en estado de putrefacción. Color café rojizo a negro. 3/8 pulg., (10mm), de largo. Los depositan o los pegan en una área protegida y caliente, cerca de la comida. Se encuentra a fuera de las casas, no se reproduce a dentro de las casas. Machos voladores, son atraídos por la luz, vuelan hacia las ventanas.. Color café amarillento, ½ pulg., (12mm), de largo. Son depositados bajo la corteza de leños caídos, estacas, etc. Comúnmente se localizan a fuera de las casas, en hoyos de los árboles y composta. Dentro de las casas prefieren el calor, humedad, en lugares huecos dentro de las paredes de los bloques y áticos con muy poca ventilación. Voladores fuertes, Omnívoros. Color café oscuro a negro, 3/8 pulg., (10mm), de largo. Son depositados o firmemente pegados en la superficie de áreas protegidas. Periplaneta australasiae Cucaracha café Periplaneta brunnea Cucaracha de bandas cafés Supella longipalpa Cucaracha alemana Blattella germanica Cucaracha oriental Blatta orientalis Cucaracha de la madera de Pennsylvania Parcoblatta pennsylvanica Cucaracha café ahumada Periplaneta fuliginosa Parámetros reproductivos en cucarachas �Los huevos de las cucarachas están alineados verticalmente de dos en dos dentro de la oteca, las cuales están cubiertas por secreciones de las glándulas accesorias; después será expulsada hacia el exterior. En algunos casos las cucarachas pueden cargar la oteca durante varías semanas con en Blatella germanica. En las especies ovoviviparas , la oteca se retrae hacia la bolsa incubadora, hasta que la progenie eclosione. En algunas especies puede ocurrir la partenogénesis (13). El número de huevos, otecas y la duración del periodo de incubación varían según la especie (Ver Tabla 2). Tabla 2- Descripción de parámetros reproductivos de las especies de cucarachas de importancia en salud pública. Especie No de otecas y huevos por oteca 6-14 otecas por hembra 14-15 huevos por oteca Periodo de incubación (días) Ciclo de Promedio de tiempo desarrollo (días) de vida de un adulto (días) Rango: 38-49 Rango: 168-786 Hembra: 90-706 Promedio: Promedio: 600 Macho: 90-362 Promedio: 365 145 Rango: 224-340 Hembra: 244 44 Periplaneta americana 20-30 otecas por hembra Promedio: 40 24 huevos por oteca Periplaneta australiasiae 32 otecas por hembra Promedio: 81 21-28 huevos por oteca Periplaneta brunnea Macho: 290 �14 otecas por hembra Promedio: Rango: 90-276 Hembra: 90 70 Promedio: 161 Macho: 115 Rango:14-215 Rango: 54-215 <200 Promedio: Promedio: 103 14-18 huevos por oteca Supella longipalpa 4-5 otecas por hembra 30-40 huevos por oteca 28 Blatella germanica 8 otecas por hembra 16 huevos por oteca Rango 42-81 Rango:206-800 Hembra:34-181 Promedio: Promedio: 589 Macho:112-160 Rango:32-36 Rango:280-766 <180 Promedio: Promedio: 318 60 Blatta orientales 30 otecas por hembra 32-36 huevos por oteca 34 Parcoblatta pennsylvanica 10 otecas por hembra 20 huevos por oteca Rango 24-70 Rango:140-716 Hembra:218 Promedio: Promedio: 600 Macho:215 45 Periplaneta fuliginosa Patógenos asociados con las cucarachas de importancia en salud pública. �Pocas son las especies de importancia en el área de salud y que invaden las viviendas, como lo son la cucaracha americana, alemana, café, ahumada, oriental y australiana (14, 15, 16, 17), que representan una plaga de prácticas nocturnos y una alimentación de tipo omnívora, que operan como vectores naturales en las casas; acarreando gérmenes patógenos que logran perdurar viables en su heces, tubo digestivo e integumento por varios días o semanas (Ver Tabla 3). Enfermedades producidas por diversos organismos como las bacterias, se pueden establecer en el cuerpo de las cucarachas. Diversas y severas enfermedades de tipo digestivo, se han transmitido de manera experimental, diversos tipos de gastroenteritis aparecen como las principales enfermedades transmitidas por las cucarachas. Además de nauseas, dolores abdominales, vomito, diarrea, disentería y otras enfermedades. Los agentes patógenos que producen estas enfermedades, son transportados en las patas y cuerpos de las cucarachas y son depositados en la comida y diversos utensilios. El excremento y mudas también contienen numerosos alérgenos que afectan ojos y piel. Pero uno de los más importantes, son los que producen asma; cualquier tipo de contacto con las cucarachas puede producir las enfermedades antes mencionadas, sin embargo no están asociados con enfermedades epidémicas. (18, 19, 20) - Bacterias: En condiciones naturales se han hallado en las cucarachas especies patógenas que promueven diversos cuadros de disentería, diarrea, fiebre tifoidea, gastroenteritis, entre otros padecimientos. - Hongos: Estudios micologicos han revelado la presencia de actinomicetos y blastomicetos patógenos, en integumento, buche, intestino posterior y hemoceloma de especimenes de capturados en viviendas y hoteles. - Helmintos: Este grupo de organismos patógenos, representa después de las bacterias, el grupo más relevante, toda vez que muchos de ellos son parásitos primarios del hombre. Estos se albergan en el aparato digestivo de las cucarachas, y adicionalmente se ha observado la presencia de huevos de helmintos en las heces de estos insectos. - Protozoarios: Se ha demostrado la presencia de protozoarios patógenos en el hombre que pueden ser transportados por la cucarachas, que pueden desencadenar principalmnte enfermedades como la amibiasis y giardiasis. - Virus: Las cucarachas son solamente vectores mecánicos de virus, no representando un serio problema en este aspecto. Tabla 3.- Agentes patógenos asociados con las especies de cucarachas de importancia en salud pública. Bacterias Patógeno Alcaligenes faecalis Enfermedad Especie de Cucaracha Gastroenteritis, infección de heridas, vías urinarias Periplaneta americana Blatta orientalis Bacillus subtilis Conjuntivitis, contaminación de comidas P. americana B. orientales �Blaberus craniifer Bacillus cereus Contaminación de comidas B. craniifer Campylobacter jejuni Enteritis B. orientales P. americana Clostridium perfigrens Gangrena Cucarachas en general Clostridium perfigrens Gangrena B. orientalis Clostridium novii Gangrena B. orientalis Enterobacter aerogenes Bacterias B. germanica P. americana Escherichia coli Diarrea, Infección de heridas B. germanica P. americana B. orientalis Klebsiella pneumoniae Neumonía, Infecciones en vías urinarias Cucarachas en general Mycobacterium leprae Lepra B. germanica P. americana P. australasiae Nocardia sp. Actinomycetoma P. americana Proteus morganii Infección de heridas P. americana Proteus rettgeri Infección de heridas P. americana Proteus vulgaris Infección de heridas P. americana B. orientales B. craniifer Proteus mirabilis Gastroenteritis, Infección de heridas P. americana Pseudomonas aeruginosa Gastroenteritis, Infecciones respiratorias P. americana B. orientales B. germanica B. craniifer Salmonella bredeny Gastroenteritis, Contaminación de alimentos P. americana Salmonella newport Gastroenteritis, Contaminación de alimentos P. americana Salmonella oranienburg Gastroenteritis, Contaminación de alimentos P. americana �Gastroenteritis, Contaminación de alimentos P. americana Salmonella parathyphi- Gastroenteritis, Contaminación de alimentos B P. americana Salmonella panama Streptococcus pyrogenes Neumonía B. orientalis Salmonella typhi Tifoidea B.orientalis Salmonella typhimurium Gastroenteritis, Contaminación de alimentos B. germanica Nauphoeta cinerea Salmonella rienmorbificans Gastroenteritis, Contaminación de alimentos P. americana Salmonella bareilly Gastroenteritis, Contaminación de alimentos P. americana Serratia marscesens Contaminación de alimentos P. americana B. rientales B. germanica Shigella dysenteriae Disentería B. germanica Staphylococcus aureus Infección de heridas, infección de piel, infección de órganos internos B. rientales B. germanica B. craniifer Streptococcus faecalis Neumonía P. americana B. rientales B. germanica Vibrio spp. No aplica B. orientalis Yersinia pestis Plaga B. orientalis Hongos Aspergillis niger Neumomicosis, otomicosis P. americana Aspergillis fumigatis Neumomicosis B. orientales broncomicosis Helmintos Ancylostoma duodenale Gusano P. americana Ascaris lumbricoides Gusano redondo P. americana Ascaris sp Gusano redondo B. orientalis Enterobius vermicularis B. orientales B. germanica �Hymenolopsis sp P. americana Necator americano P. americana Trichuris trichuria Triquinosis P. americana B. rientales B. germanica Entamoeba hystolytica Amibiasis P. americana B. rientales B. germanica P. australasiae Giardia sp. Giardiasis Cucarachas en general Virus Poliomyelitis Polio B. germanica P. americana Supella longipalpa Principales productos empleados para el control de las cucarachas La clave para el control de las cucarachas es la limpieza, de tal manera que no queden al alcance de estos insectos omnívoros sustancias que posiblemente sirvan de alimento. Esta tarea es más difícil de llevar a cabo en hogares en los que hay niños y mascotas. En las áreas más cálidas, la reinfestación se propaga desde el campo, por los conductos de la calefacción y tubería de agua de las viviendas, o al introducir víveres o equipaje que han estado en sitios con abundantes cucarachas. Las cucarachas son difíciles de controlar permanentemente con insecticidas. Esto sucede debido a que estos insectos fácilmente se hacen resistentes a los tóxicos más comunes (21). Por lo general los insecticidas se aplican por aspersión o espolvoreados en las madrigueras. Se han obtenido resultados prometedores utilizando el aerogel de sílice deshidratado que mata a los insectos por pérdida de agua y ácido bórico que es ingerido o puede introducirse en las cucarachas a través de la superficie general del cuerpo. Buenos resultados son posibles cundo se persigue un control y no la erradicación; los restaurantes, plantas de procesamiento de alimentos y una variedad de establecimientos comerciales por lo general utilizan productos comerciales de contacto. (Ver Tabla 4) Estos establecimientos pueden hacer mucho para reducir el mínimo sus propios problemas, guardando bien los alimentos y a través del manejo cuidadoso de los abastecimientos que entran para prevenir re-infestaciones (22, 23). �Tabla 4. Lista de los productos que se utilizan y forma de aplicación para el control de las cucarachas. Tipo de Aplicación Aspersión Residual Polvos Micro encapsulado humectables Dursban 2E Ficam H Diacap 300 CS Diazinon microencapsulado Alfadex CE Demon PH Empire Clorpirifos microencapsulado Baygon 1.5E Cynoff Demand CS λ Cialotrina microencapsulada Biothrine CE Biothrine PM DDVP Baygon PH Safrotin CE Demon 20 CE Bestox (Piretroides) Cynoff (Piretroide) Nnox Out (organofos.) Aerosol DDVP Polvos Ácido Bórico Piretrinas Ficam Otros piretroides Drione Dursban Dri-Die-67 Diazinon Baygon Cebos Otros Alstar Killmaster sulfluramida Dursban Killmaster II �Conclusiones Las cucarachas son artrópodos que representan una plaga de hábitos nocturnos y alimentación omnívora que actúan como vectores naturales, transportando gérmenes patógenos (bacterias, helmintos, hongos, protozoarios y virus) que pueden permanecer viables en su integumento, tubo digestivo y excremento. Aunado a evidencias que señalan que estas producen substancias que desencadenan procesos alérgicos. Sin lugar a dudas estos datos mostrados justifican el control de estos insectos ya que se constituyen en un riesgo para salud pública en las colectividades humanas. Resumen Las cucarachas pertenecen a uno de los grupos de insectos mejor conocidos y más antiguos; los organismos pertenecientes a este grupo, tienen la característica de adaptarse a una gran variedad de hábitat. Presentan una gran variedad de formas, tamaños, colores y hábitat en los que subsisten, siendo solo unas cuantas las que representan importancia en salud pública; en la actualidad se conocen alrededor de 45 patógenos que pueden transmitir de manera mecánica y natural, principalmente bacterias, hongos protozoarios, helmintos y virus. Mostrándolos como un riesgo para salud pública en las colectividades humanas. Palabras claves: cucarachas, vectores, salud pública Abstract The cockroaches belong to one of the groups of well-known and better older insects; the organisms pertaining to this group, have the characteristic to adapt to a great variety of habitat. They display a great variety of forms, sizes, colors and habitat in which subsist, few that represent importance in public health; in the present time there are around 45 pathogens known that can transmit of mechanical and natural way, mainly bacteria flora, different protozoan, pathogenic worms, fungus, and viruses. Showing them like a risk for public health in the human communities Key Words: cockrach, vector, public health Referencias 1. Prado, M.A., F. C. Pimenta, M. Hayashid, P. R. Souza, M. S. Pereira e Elucir Gir 2002. Enterobactérias isoladas de baratas (Periplaneta americana) capturadas em um hospital brasileiro Rev Panam Salud Publica 11(2): 93-97 2. Majekodunmi, A., M.T Howard and V. Shah 2002. The perceived importance of cockroach infestation to social housing residents Journal of Environmental Health Research Vol 1 Issue 2 ( November): 27-34 3. Mallis, A. 2004. Handbook of Pest Control. 9a Ed. Editorial Director Stoy A. Hedges, B.C.E. 11397. 4. Harwood, R.F. and M.T. James. 1993. Entomología Médica y Veterinaria. 3ª Ed.. Editorial UTEHA. 1-615 5. Mallis, A., Op. cit. 6. Ramírez Pérez, J. 1989. La cucaracha como vector de agentes patógenos. Bol. Of. Sanit. Panam. 107(1):41-53. �7. Fathpour, H., G. Emtiazi and E. Ghasemi 2003. Cockroaches as Reservoirs and Vectors of Drug Resistant Salmonella spp Iran. Biomed. J. 7 (1): 35-38 8. Jaramillo, G.I. 1999. Biología de las Cucarachas. Revista de la Asociación Colombiana de Alergia, Asma e Inmunología. Vol. 7(3) (www.encolombia.com/artículos_alergia8-1.htm) 9. Prado,M.A., et. al., Op. cit. 10. Rozendaal, F.G. 1997. Vector control methods for use by individuals and communities. Geneva: World Health Organization pp. 288–301. 11. Harwood, R.F. and M.T. James, Op. cit 12. Majekodunmi, A., et. al., Op. cit. 13. Harwood, R.F. and M.T. James, Op. cit 14. Bennett, G.W., J.H. Owens and R.M. Corrigan 1997. Truman`s scientific Guide to Pest Control Operations. 5ath Ed. A Purdue University. Advanstar Communications Project. 574 pp 15. Majekodunmi, A., et. al., Op. cit. 16. Ramírez Pérez, J., Op. cit. 17. Mallis, A., Op. cit. 18. Sramova, H., Daniel, M., Absolonova, V., Dedicova, D., Jedlickova, Z., Lhotova, H., Petras, P. and Subertova, V. 1992. Epidemiological role of arthropods detectable in health facilities. J. Hosp. Infect. 20: 281-292. 19. Gliniewicz, A., E. Czajka, A. E. Laudy, M. Kochman, K. Grzegorzak, K. Ziókowska, B. Sawicka, H. Stypulkowska-Misiurewicz and K. Pancer 2003. German Cockroaches (Blattella Germanica L.) as a Potential Source of Pathogens Causing Nosocomial Infections Indoor and Built Environment, Vol. 12, No. 1-2, 55-60 20. Kutrup, B. 2003. Cockroach Infestation in Some Hospitals in Trabzon, Turkey Turk J Zool 27: 73-77 21. Hsiu-Hua, P., W. Shu-Ching and H. Err-Lieh 2005. Insecticide resistance in German cockroaches (Blattella germanica) from hospitals and households in Taiwan International Journal of Environmental Health Research Vol. 15: No. 1/February: 33 - 40 22. Harwood, R.F. and M.T. James, Op. Cit 23. Mille, P. and B. Peters 2004. Overview of the public health implications of cockroaches and their management N S W Public Health Bull 15(11–12) 208–211 �LA PROBLEMÁTICA ACTUAL EN LA RELACIÓN MÉDICOPACIENTE: UNA VISIÓN REDUCCIONISTA VS. UNA VISIÓN INTEGRADORA. Luis Martín Bernal Lechuga Área Académica de Medicina, Instituto de Ciencias de la Salud, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo (Hidalgo, México) E-mail: lmbernal75@hotmail.com Introducción El término relación involucra a dos o más personas, objetos, variables, etc. Escribir sobre la relación médico-paciente obliga a considerar todos los aspectos y participantes que intervienen en la misma. Mucho se ha escrito acerca de que la relación médico-paciente actual enfrenta una grave problemática al grado de que algunos autores como Césarman consideran que ya no es buena ni mala, sino que simplemente ha dejado de existir (1). Sin embargo, la mayoría de los interesados en su estudio y en proponer soluciones a la distorsión, se aproximan con una tendencia casi exclusiva en uno de los involucrados que generalmente es el médico, y al que señalan como el único culpable de la ruptura; considerando al paciente como estático y homogéneo; peor aún olvidan que ambos forman parte de una sociedad. En otras palabras, el énfasis en la díada, al menos implícitamente ha persistido en un enfoque en el que el único responsable es el médico. Al parecer éste es el enfoque favorito de los que gustan hablar y escribir sobre némesis médica tratando de regresar al médico a una edad de piedra o de los que esperan encontrar la solución al problema en el médico, como el único participante; tal vez porque el involucrar al paciente y a la sociedad alterará sus escritos además de resultarles más complejo. Este enfoque es al que me permito llamar “visión reduccionista”. Los partidarios de la “visión reduccionista”, encuentran que algunas de las causas de la actual distorsión de la relación en estudio se deben a problemas en la formación del médico, al tiempo que reconocen la diferencia que existe en la relación en la práctica privada calificándola de buena o excelente, ¿no es esto una contradicción?, ¿acaso existen dos tipos de Facultades y Escuelas de Medicina en el país, las que forman médicos que desempeñarán sus actividades en el medio institucional y otras para los que lo harán en el medio privado?, y ¿ las primeras no incluyen en sus planes de estudios la esencial disciplina de la ética y las segundas sí lo hacen?. Como esto no sucede, argumentan entonces, que en la práctica privada existe de por medio el factor económico (las ganancias que el médico obtiene), y por ello el trato diferenciado. ¿Serán realmente estos factores los determinantes? o, cabría la posibilidad de detenerse a pensar que detrás de esa buena relación se encuentran una serie de circunstancias tales como, que en el medio privado el paciente tiene la libertad de elegir al médico que consulta; que ambos tienen una gama de tratamientos disponibles el médico por ofertar y el paciente por seleccionar; que no esta de por medio la duración y el número excesivo de consultas por atender; que el medio institucional de ahora no mantiene los principios de su fundación; etc.. No esta de más recordar que en el medio institucional actual ocurre exactamente lo contrario a lo expuesto previamente, el paciente no tiene la posibilidad de elegir al médico que consulta, el médico se ve limitado en cuanto a las variedades de tratamientos, y el paciente además de desconocerlas también las tiene restringidas; existe de por medio cronometrado el tiempo máximo para cada tipo de consulta, de primera vez y subsecuente, como si todos los pacientes tuvieran el mismo padecimiento y situaciones que comentar de aquellos en los que se efectuaron las mediciones; y/ o se adaptan al sistema, o el paciente opta por no utilizar los servicios y recurrir a una mejor opción (la consulta privada con un médico), y el médico por quedarse sin empleo. �Adicionalmente, se encuentra el papel que la sociedad confiere al médico y al paciente; las revoluciones tecnológica y comercial actuales. La percepción de éstas y otras consideraciones es a lo que me permito nombrar “visión integradora”. El médico, el paciente y la sociedad ejercen entre sí una acción sumamente compleja, y cada uno hace contribuciones a favor o en contra de la relación médico-paciente. No pretendo desmentir que el médico (sin generalizar a todo el gremio) ejerce gran influencia en la problemática que enfrenta actualmente la relación médico-paciente, pero si hacer una reflexión acerca de la naturaleza del problema, sobre la manera como se investiga y actúa al respecto. Relación médico-paciente La relación médico-paciente es un proceso interpersonal, intersubjetivo y que enfrenta en una relación dinámica al paciente que se reconoce por lo menos socialmente como tal, con el médico a quién también se reconoce como tal. Es el campo de acción médica y se configura dentro de un contexto transferencia-contratransferencia. El “símbolo cura” y el “símbolo curación” se ponen al servicio de la dinámica. Aquel que adopta el papel de enfermo, por cualquiera que sea la razón, se siente así mismo, por lo menos temporalmente, incompleto, debilitado y abierto al miedo, la amenaza de la enfermedad física o mental lo despoja de sus defensas “normales”, y lo vuelve más frágil. Por supuesto si la enfermedad es severa además carga con el miedo final de la muerte misma, del no ser; y apela en forma global y casi manifiesta que el médico lo “cure” con su acción o con su medicamento. Esta fantasía transferencial de restitución junto con la transferencia homologa con la que el médico le corresponde “quiere que el paciente se cure”, basado en el hecho de que él tiene lo que el paciente quiere y necesita; cimienta un hecho médico, en un campo de deseos restitutivos narcisísticos de ambos. En él, ambos deben de estar de acuerdo en conceder el honor a la naturaleza toda vez que se logra la “curación”. Existe una asimetría en los papeles basada en etiquetar al paciente como pasivo y dependiente y al médico como experto, el uno con necesidad de protección y el otro con necesidad de control. La existencia misma de la relación se basa en la premisa de que el paciente no sabe lo que sabe quien lo trata. El médico espera que el paciente acepte lo que él recomienda en sus propios términos; el paciente busca servicios en sus propios términos; en el hecho de que cada uno busca que sus propios términos ganen, existe el conflicto. El patrón de relaciones ejerce influencia en el contenido de la interacción, independientemente de las características individuales de los participantes (2,3,4) Para entender la dinámica de esta relación tan compleja en los tiempos actuales, es necesario revisar cuando menos parcialmente las principales circunstancias que conducen a la tan nombrada distorsión en la misma. Para tal fin, se propone un abordaje por separado de las mismas en cada uno de los participantes, lo cual no implica que ocurran de forma aislada. Sociedad La sociedad confiere roles al paciente y al médico. Un paciente, por definición, es incapaz de realizar sus papeles sociales normales; una sociedad no puede afrontar por mucho tiempo la toma endémica o epidémica del papel del paciente e interpreta su papel como indeseable, temporal y básicamente disociador. El elemento decisivo al asumir el papel de paciente probablemente no es sólo el hecho de la enfermedad o el accidente, sino el reconocimiento por parte del individuo afectado o ciertas otras personas de una necesidad de ayuda particular para adaptarse a esa condición. Al paciente se le hace dependiente de la sociedad sana. Algún tipo de proceso terapéutico, espontáneo o con ayuda, se concibe como necesario para la recuperación. Dentro de esta red, el médico es uno de los tantos a quienes se consultan y, lo que es más, cada persona consultada, ya sea un profesional o no, es una fuente potencial de diagnóstico, prescripción y también de referencias. �La sociedad le encarga al médico implícitamente el devolver a la persona afectada su funcionamiento completo en relación con sus obligaciones sociales. Esto es, el médico es el símbolo del sano y normal encuentro del enfermo, (es parte de ser una profesión el que se le dé poder oficial de definir y por ende crear la forma de segmentos problemáticos de comportamiento social: el juez determina lo que es legal y quién es el culpable, el sacerdote lo que es santo y lo que es profano, el médico lo que es normal y quién está enfermo). La actitud profesional hacia el paciente tiene muchas facetas, pero su centro es probablemente la neutralidad afectiva, el vital mecanismo de distanciamiento que previene al médico de convertirse en el colega emocional del paciente en la enfermedad, destruyendo así su juicio objetivo y su eficacia terapéutico-educativa. La posición neutral del médico no quiere decir que el sea determinadamente insensible, sino más bien que su respuesta emotiva primaria es controlada y complicada. Estrictamente hablando, el médico ideal muestra simpatía pero no empatía, entendimiento intuitivo sin una involucración de escala completa: debe entender los sentimientos del paciente sin sentirlos él mismo. Este ideal de neutralidad medida puede alterarse de muchas maneras. Puede ser el elemento más artificial, tanto como el más elemental, en el papel profesional y uno de los aspectos más difíciles de “aprender” durante su formación profesional. Existen dos dimensiones importantes en su actitud profesional; la primera es la tendencia a tratar a todos sus pacientes de manera similar, por supuesto que no prescribiendo terapias idénticas, sino más bien visualizándolas en algún sentido como miembros iguales de un universo de salud y de enfermedad; la segunda es la norma de la especificidad funcional, que obliga al médico a limitar su atención y sus actividades a un ámbito rígidamente circunscrito a lo estrictamente “médico”. La línea que separa el ámbito médico del no médico es, entonces, cambiante y, puede verse envuelto en una serie de preocupaciones globales que las que se comparan más con la de un sacerdotehechicero (los médicos son descendientes directos de éstos personajes), que con las de un técnico hospitalario (5). En la época actual se han dado cambios en la tecnología, en la organización de los servicios de salud y en su costo; los cuales han dado origen a la medicina tecnificada (al grado que se concibe un hospital sin médicos, pero no sin máquinas) y comercializada; y ante esta situación la relación médico-paciente ya no es buena ni mala, simplemente dejó de existir (6). Con respecto a la tecnología el filósofo Martin Heidegger, manifestó: “…El desarrollo de la técnica se efectúa cada vez con mayor velocidad y no podrá ser detenido en parte alguna. En todas las regiones de la existencia el hombre esta cada vez más estrechamente cercado por las fuerzas de los aparatos técnicos y de los autómatas. Los logros del mundo técnico son conocidos y públicamente admirados por el camino más rápido. Pero una cosa es haber leído u oído algo, y otra cosa es reconocerlo, es decir, pararse a pensarlo. Se admira incluso la audacia de la investigación científica y no se piensa nada al respecto. Lo verdaderamente inquietante, con todo, no es que el mundo se tecnifique enteramente. Mucho más inquietante es que el ser humano no esté preparado para esta transformación universal; que aún no logremos enfrentar meditativamente lo que propiamente se avecina en esta época. Para todos nosotros las instalaciones, aparatos y máquinas del mundo técnico son hoy indispensables. Dependemos de los objetos técnicos; nos desafían incluso a su constante perfeccionamiento. Sin darnos cuenta nos encontramos tan atados a los objetos técnicos que caemos en relación de servidumbre con ellos. La revolución de la técnica es tal que puede llegar a que el pensar calculador sea el único válido y practicado” (7). Sin lugar a dudas es una reflexión tan atinada y aplicable a la época actual que pareciera la hubiera hecho hace a penas unos cuantos días. La ciencia moderna fuerza a la naturaleza a que le brinde respuestas, parecería que la estuviera torturando. Cuando los pacientes padecen enfermedades no bien entendidas dentro del control terapéutico de la medicina moderna, el problema principal del médico y el paciente es el de adaptarse a las experiencias tensionantes causadas por la “incertidumbre”. Es preciso reconocer que el avance de la ciencia se ha dado en forma pareja con un retroceso en el cuidado general de la salud y en la prevención de las enfermedades. �La medicina sólo constituye uno de los aspectos de la vida social, que nos plantea problemas a través de la ciencia, la racionalización, la automatización y la especialización (ya no se consulta a un médico sino aun grupo de especialistas) (8). Aparece también el problema de la comercialización de la medicina. La medicina privada de antaño ha dejado de existir. Ahora es la medicina empresarial. Ésta no ha resuelto el problema de la asistencia médica de manera universal, pues es inaccesible para la mayor parte de la población. Por ello la antigua asistencia pública se ha transformado, ahora, en las diversas modalidades de medicina social. Para apoyar a la medicina empresarial han surgido los seguros privados de salud. Éstos tampoco resuelven el problema, pues son caros y se otorgan con muchas cláusulas limitantes. Son un negocio y no un servicio. Los seguros privados de salud tienden a racionar la oferta de servicios, mientras que los sistemas sociales de salud tienden a racionar la demanda. Paralelo a la industrialización de la medicina aparece el fenómeno de la burocratización, que nuevamente ocurre en todos los ámbitos, pero que en el campo de la medicina despierta mayor interés, en el que se da el caso de la desintegración de la persona, resultante de la objetivización de una multiplicidad de datos; y esto es tal que ahora el hombre es considerado un recurso, un recurso humano. Para un amplio segmento de la población general, la relación médico-paciente se está sustituyendo; el paciente no contrata los servicios de una persona profesional sino de una institución profesional (9). El mercado se ha llenado de miles de medicamentos gracias al asombroso logro de la química moderna. Algunos de ellos son verdaderamente sorprendentes. Imposible aprenderse los nombres comerciales de todos. Muchos de estos medicamentos nuevos son variedades de un mismo medicamento original, sólo que más caros. La industria farmacéutica es violentamente competitiva. Se difunden en la prensa verdades a medias para pregonar las bondades del medicamento que se vende y los defectos del medicamento de la competencia. Se desorienta al público. La intención es que pacientes “bien informados” exijan o le rechacen al médico ciertos medicamentos (10). Las revistas científicas de temas médicos están plagadas ahora de esta propaganda. Illich le asigna a la industrialización y a la tecnología las causas de lo que considera una medicalización innecesaria de nuestra sociedad. Gaddamer comenta al respecto: “…En el gran aparato de nuestra civilización, todos somos pacientes” (11). Se puede apreciar que el médico es “lentamente proletarizado”, y los pacientes son colectivizados en un movimiento consumista; pero con todo y esto la perspectiva interpersonal debe resistirse tenazmente a desaparecer. La medicina parece ser una verdadera ciencia universal, especialmente si a ese todo se le suma el todo de nuestro mundo social. Médico La problemática se genera desde la formación del médico. Los profesores que eran profesionistas de prestigio, fuente de inspiración y de entusiasmo, con gran vocación académica y científica; los románticos de la medicina, comienzan a desaparecer de las aulas de las Facultades y Escuelas de medicina. Las grandes personalidades de la medicina se esfumaron. El ejercicio de la medicina no admite sustituto para la excelencia, deben existir sólo médicos preparados, estudiosos, responsables, honestos y trabajadores. Los médicos sólo pueden ser de primera. No hay diagnóstico simple ni tratamiento sencillo (12). El médico de la actualidad ejerce control sobre el paciente al que considera siempre ignorante en cuestiones de salud. Es soberbio, pretende dominar al paciente, olvida que el paciente sólo estará bajo su tratamiento hasta que se recupere y que debe aconsejarlo y ayudarlo. Separa a la enfermedad de la persona y no piensa en la relación entre el paciente con su enfermedad y trata a la primera como un ente propio con el cual es necesario acabar. En la revisión clínica de hoy, reconstruye al paciente como sobre la base de un fichero, si ha extraído las fichas que corresponden, los valores serán los propios, pero entre ellos no figura su valor como persona del �paciente, evidentemente esto sucede en el caso del paciente encerrado dentro del aparato de una clínica. Exagera la enfermedad y sobre valora una imposible salud. Es cada vez más tecnócrata y se distancia de la ciencia, aprender a manejar máquinas y a apretar botones nada tiene que ver con el conocimiento científico. Trabaja con más recursos, pide los estudios que desea e impone el tratamiento necesario; sin angustiarse por la capacidad económica del enfermo; sin considerar que el tratamiento del médico implica también conceder libertad de decisión al paciente y no sólo formular prescripciones o escribir recetas. Olvida que el arte de su profesión supone saber escuchar y entender al enfermo; saber llevar afecto la sucesión de hechos clínicos y que para resolver todo lo relacionado con la clínica se debe tener una formación ética, que la ética clásica establece el conjunto de virtudes que debe reunir el buen médico. El médico de consultorio a la antigua es una especie en extinción (13,14,15,16). En contraparte, el médico al igual que toda la sociedad y todas las profesiones recurre a la racionalidad de la ciencia y a los recursos de la tecnología. Gran parte de la distorsión de la relación médico paciente se atribuye a la técnica, y sin embargo, difícilmente se considera médico en la actualidad a un médico sin aparatos sofisticados o sin acceso a ellos. Los médicos que desean evitar gastos y procedimientos inútiles incluso riesgosos a sus enfermos pronto son descartados y sustituidos por otros más agresivos, más a la “moda”. En los sistemas institucionales se le limita a ciertos tratamientos, por la demanda existente se le satura de consulta e incluso se calcula un tiempo para la atención y para el número de cada una de las mismas. También en este sistema la gran mayoría de los hospitales y clínicas pueden carecer de lo fundamental y son atendidas por médicos heroicos. Los sistemas de salud social, generalmente funcionan con base en un trabajo médico barato en este caso la satisfacción del médico es más profesional que económica aunado en que dentro y fuera del sistema la mayoría de los médicos obsequian parte de su trabajo. Nada resulta más chocante para el verdadero médico que cobrarle al enfermo, que el poner precio a su trabajo, que tener que vivir de sus pacientes. El médico es el que da la cara tanto por el sistema industrial y comercial de la salud como por el sistema burocrático social, es el representante social de ese inmenso enjambre, le toca toda la responsabilidad y la peor y más pequeña de las partes. Se ha convertido en instrumento involuntario de un cierto abuso, de un consumismo irracional de la industria de la salud; el que todas las empresas relacionadas con tal industria obtengan enormes utilidades, no compete al médico. Lo dicho hasta aquí podrá resumirse en una frase de Eduardo Césarman: “la tecnología minimiza el papel del médico; la mercantilización lo desvirtúa y la socialización lo proletariza” (17). En el estado oculto de la salud se reconoce el misterio de la vitalidad. Tal es la vida y así también alcanzar a rozar la muerte. El médico, en tanto experto, es, precisamente quien se ve enfrentando a ese doble aspecto de la existencia. Por esta razón todo médico formula el juramento hipocrático. Pero se sabe también hasta que punto pesan sobre su conciencia el aparato de nuestra civilización, la experiencia de la muerte y los problemas relativos a la prolongación de la agonía; y es que para todo médico primero es la vida, luego la función y por último la estética del paciente. En el médico se da una especial curiosidad por la naturaleza y una irrenunciable vocación de servicio. Como en ninguna otra profesión, en él convergen ciencia y humanismo. Se es médico, en la abundancia y en la pobreza; de ricos y pobres; con el recurso de costosos equipos o con sólo los órganos de los sentidos; en un gran hospital o en la selva; en un ambiente higiénico o en la insalubridad, fecalismo y contaminación; en la paz y en las catástrofes; con bata blanca y sin ella; de día y de noche. Se es médico solidario y respetuoso, con sencillez, sin prepotencia, se es médico sin hacer alardes de sacrificio, sin sobreactuar el cansancio, sin pregonar la generosidad, para ser médico se requiere estilo. Cada médico lo es a su manera. Se es médico como se pueda. Todo lo relacionado con el médico es ambivalente, son objeto de halagos y burlas; los maldicen y los llenan de bendiciones. Es la profesión más asediada (18,19). Paciente �No es culpable ni inocente es sólo una víctima. Debe ser el más respetado en la relación, los principios de la bioética deben y buscan siempre su beneficio. Es un extranjero entre los sanos. Es el hereje, el infiel, el ignorante, el débil de carácter, el dominado, el subordinado. Debe tener el derecho de elección del médico de su preferencia, el médico elegido debe gozar de libertad (ninguna de estas situaciones ocurren en los actuales sistemas sociales). Hoy en día se relaciona más con los aparatos que con el médico. Debe tener los derechos a ser informado de todo lo que al él se refiera y posterior a otorgar su consentimiento; debe obtener la garantía de la confidencialidad en la información que manifieste; la opción a una muerte digna y la elección de asistencia moral y espiritual (20). Esta sección es poco tratada, sin embargo es una verdad oculta que todo médico y algunos pacientes conocen muy bien, que hay del paciente que llega a preferir más a los aparatos y a los equipos, a tenerles más confianza que a los médicos que los manejan e interpretan los resultados que generan. El que exige la verdad y no desea que se le diga. El que oculta sus malos hábitos e insiste en que no los tiene. El que habla mal de otros médicos al médico con el que se encuentra en el momento y pronto hará lo mismo de éste. El que hecha la culpa de sus males a los medicamentos y/o al médico y no a la enfermedad. El que todo lo niega y dice estar muy bien. El que pone a prueba al médico guardándose información que el considera importante. El suspicaz que se cree saber medicina. El que no le agrada ir con un médico que no cobre, por el contrario le gusta ir con uno que le cobre mucho a otros, pero que a él no le cobre. El que aprovecha la presencia de un médico en un evento social para obtener una consulta rápida y ahorrarse el honorario, y que aún a sabiendas que ésta se llevó a cabo sin los recursos necesarios y sin una buena exploración por las circunstancias, al obtener la prescripción califica al médico en su calidad. El que también quiere encontrar en el médico la felicidad y la explicación a sus conflictos existenciales; estos pacientes que se piensa son la minoría, ¿bajo qué códigos de ética actúan?, y hasta cierto punto es bien tolerada esta actitud, porque después de todo, salvo la posible excepción de aquellos con ciertos defectos congénitos severos, nadie nace siendo un paciente. Ni tampoco puede asumir esperar el papel de paciente como consecuencia de una secuencia de desarrollo normal, como el resultado de una educación para “ser paciente” (21). Conclusiones El binomio médico-paciente es fundamental en el acto médico, de manera que esta relación debe ser respetuosa, prudente y muy cercana al sufrimiento de los enfermos; dejando claro que el paciente debe ser el más respetado en la relación. Es necesario que el médico tome cada vez más conciencia de en que medida depende de el dialogo y la colaboración de su paciente; y que siempre que vaya a intervenir a un paciente en cualquier forma, le ofrezca una explicación de lo que le va a ser, que el paciente tenga la posibilidad de elección y otorgue su consentimiento voluntario; recordando que una sociedad pluralista las personas instruidas pueden influir en su evaluación cultural y moral de los riesgos. Se requiere un cambio en el actual sistema institucional que favorezca una adecuada relación médico-paciente, que a su vez detecte y corrija sus desviaciones; para lo cual los comités de ética ocupan un papel importante. La bioética debe permear a los estudiantes y figurar en las curriculas de las escuelas de medicina, instituciones universitarias y de posgrado, que forman profesionales de la salud (22). Es prudente otorgarle realidad a cierta condición del ser humano: la condición según la cual quizás el otro no sólo tiene derechos, sino que, a veces, también puede tener razón. En está era que vivimos de la tecnificación, se debe rescatar el principio de que es nuevamente el hombre el importante (médico, paciente, miembro de la sociedad), y lo técnico un recurso, por más significativo que éste sea, sin negar y arrojar de sí lo que el hombre tiene de más propio, a saber: que es un ser que reflexiona. Resumen �En el presente trabajo se hace una revisión de algunos de los argumentos comúnmente utilizados para el actual problema que enfrenta la relación médico paciente, los atribuibles exclusivamente al médico (visión reduccionista); y la propuesta de un abordaje que incluya a los participantes en la relación el médico, el paciente y el entorno (visión integradora); con principios filosóficos, éticos y sociológicos, para una posible explicación alternativa; con la intención de contribuir a definir con mayor rigor y pertinencia los problemas reales vinculados en la problemática actual en México de la relación médico paciente, para así diseñar estrategias mas adecuadas para su solución. Palabras clave: relación, medico, paciente. Abstract The present work is a review of the most common arguments used for the current problem within the relationship physician-patient, is carried out, those that are blamed exclusivelly on the physician (limited vision); and the proposal of an approach including all parties in such relation the physician, the patient and the environment (integrating view), whit philosophical, ethical and sociological principles, for a possible alternative explanation. Attempting to contribute in defining rigorously and with relevance the real problems within the relation physician-patient, in order to design more adequate strategies for its solution. Key words: relationship, physician, patient Referencias 1. Césarman, E. 1998. Ser médico. México: Grupo Editorial Porrua. pp. 7-47 2. Luchina I. y M Yovanetti 1982. Aspectos teóricos de la relación médico-paciente. En: El grupo Balint. Hacia un modelo clínico situacional. [I. Luchina] Buenos Aires, Argentina: Paidos/Grupos e Instituciones: pp.52-71 3. Gadamer. H.G.1997. El estado oculto de la salud. En: El estado oculto de la salud [HG Gadamer] Ed. Gedisa: pp.119-131 4. Bloom S. y R. Wilson .1996. Relaciones entre médicos y pacientes. En: Ética y salud reproductiva. [G. Careaga Pérez, J.G. Figueroa Perea, M.C. Mejía] UNAM y Grupo Editorial Porrua: pp. 211-257 5. Idem. 6. Césarman, E. 1998., Op.cit. 7. Heidegger M., 1997. Serenidad. En: Filosofía, ciencia y técnica [M. Heidegger]. Santiago de Chile: Editorial Universitaria: pp. 15-30 8. Césarman, E. 1998., Op.cit. 9. Idem. 10. Idem. 11. Gadamer, HG 1997. Experiencia y objetivización del cuerpo. En: El estado oculto de la salud [HG Gadamer] Ed. Gedisa: pp 87-100 �12. Césarman, E. 1998., Op.cit 13. Idem. 14. Gadamer, HG. 1997. El estado oculto de la salud, Op cit. 15. Velasco-Suárez, M. 1999. Los comités de bioética. Conamed.4 (12):17-21 16. Hass-Martin S. 1990. La bioética fundamentos filosóficos y aplicación. Bol Of Sanit Panam: 108;391-398 17. Césarman, E. 1998., Op.cit 18. Idem. 19. Gadamer, HG. 1997. El estado oculto de la salud, Op cit. 20. Castellano-Arroyo M. 1998. La deontología médica: teoría y práctica. En: Derecho biomédico y bioética [CA Romero-Casabona, M. Casado, M Castellano Arroyo, J. Gafo, H. Gros Espelli y E. Roca Trias] Ed. Comares Granada, España: pp.29-58 21. Césarman, E.. 1998., Op.cit 22. Velasco-Suárez, M. 1999. Op.cit. � Dublin Core The Dublin Core metadata element set is common to all Omeka records, including items, files, and collections. For more information see, http://dublincore.org/documents/dces/. Title A name given to the resource Respyn Revista de Salud Pública y Nutrición Description An account of the resource La Revista Salud Pública y Nutrición, inicia en el 2000 y es una publicación universitaria con periodicidad trimestral, producida por la Subdirección de Investigación, Innovación y Posgrado de la Facultad de Salud Pública y Nutrición y la valiosa colaboración de la Dirección de Tecnologías de Información de la Universidad Autónoma de Nuevo León. Tiene como finalidad publicar y divulgar la productividad científica al ofrecer un espacio con visibilidad global para difundir toda aquella información sobre salud pública y nutrición que se genera en los ámbitos académico y científico tanto en el entorno local, regional, nacional e internacional. Creator An entity primarily responsible for making the resource Universidad Autónoma de Nuevo León, Facultad de Salud Pública y Nutrición Date A point or period of time associated with an event in the lifecycle of the resource 2000 Text A resource consisting primarily of words for reading. Examples include books, letters, dissertations, poems, newspapers, articles, archives of mailing lists. Note that facsimiles or images of texts are still of the genre Text. Título Uniforme Respyn Revista de Salud Pública y Nutrición Año de publicación El año cuando se publico 2005 Volumen Volumen de la revista 6 Número Número de la revista 3 Mes de publicación Mes cuando se publicó Julio-Septiembre Día Día del mes de la publicación 1 Periodicidad La periodicidad de la publicación (diaria, semanal, mensual, anual) Trimestral Dublin Core The Dublin Core metadata element set is common to all Omeka records, including items, files, and collections. For more information see, http://dublincore.org/documents/dces/. Title A name given to the resource Respyn Revista de Salud Pública y Nutrición, 2005, Vol 6, No 3, Julio-Septiembre Creator An entity primarily responsible for making the resource Cantú Cantú, Pedro, Fundador Subject The topic of the resource Nutrición Salud Salud Pública Ciencias de la salud Alimentos Transtornos alimenticios Description An account of the resource La Revista Salud Pública y Nutrición, inicia en el 2000 y es una publicación universitaria con periodicidad trimestral, producida por la Subdirección de Investigación, Innovación y Posgrado de la Facultad de Salud Pública y Nutrición y la valiosa colaboración de la Dirección de Tecnologías de Información de la Universidad Autónoma de Nuevo León. Tiene como finalidad publicar y divulgar la productividad científica al ofrecer un espacio con visibilidad global para difundir toda aquella información sobre salud pública y nutrición que se genera en los ámbitos académico y científico tanto en el entorno local, regional, nacional e internacional. Publisher An entity responsible for making the resource available Universidad Autónoma de Nuevo León, Facultad de Salud Pública y Nutrición Contributor An entity responsible for making contributions to the resource Ramos Peña, Esteban Gilberto, Editor Responsable Rocha Flores, Alejandra Berenice, Editor Técnico Date A point or period of time associated with an event in the lifecycle of the resource 2005-07-01 Type The nature or genre of the resource Revista Format The file format, physical medium, or dimensions of the resource text/pdf Identifier An unambiguous reference to the resource within a given context 2021033 Source A related resource from which the described resource is derived Fondo Universitario Language A language of the resource spa Relation A related resource https://respyn.uanl.mx/index.php/respyn Coverage The spatial or temporal topic of the resource, the spatial applicability of the resource, or the jurisdiction under which the resource is relevant Monterrey, N. L. 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